共生菌Wolbachia调控灰飞虱卵形成的分子机制研究
发布时间：2021-05-24 06:28
细胞凋亡（apoptosis）是细胞死亡的一种常见方式,参与生物生命周期的大多数生理生化过程;同时也是生物生殖系统发育所必需的生理过程。细胞凋亡具有相对保守的形态变化特征包括:细胞质浓缩、染色体DNA断裂、细胞核裂解以及细胞骨架降解等。昆虫中细胞凋亡的研究主要集中于其生殖系统。昆虫卵发育后期,卵巢管滋养细胞中的营养物质以及染色体通过细胞凋亡的方式提供给卵细胞,从而保证卵细胞的快速正常发育。因此,大量滋养细胞群的凋亡又被认为是昆虫卵发育成熟的标志。微生物Wolbachia是一种母系遗传的细胞内共生菌,广泛存在于节肢动物中。由于共生茵Wolbachia的存活和繁殖都依靠寄主,其与寄主有着极为密切的关系。这类共生菌能对寄主生物学特性包括生殖等产生多方面的影响,但其是寄主的初级共生菌还是次级共生菌,因寄主以及Wolbachia株系不同而不同。目前关于共生菌Wolbachia调控寄主适合度的研究不少,但是相关机制并不了解。而对于共生茵Wolbachia调控寄主卵形成相关分子机制以及寄主自身生殖系统细胞生理生化变化的研究则更少。自然界灰飞虱都100%感染共生菌WolbachiawStri株系,并且...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：163 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1. 共生菌Wolbachia的研究进展
1.1 Wolbachia对寄主的调控作用
1.2 Wolbachia对寄主生殖调控作用
2. 细胞程序性死亡
2.1 细胞程序性死亡的研究进展
2.2 昆虫细胞凋亡的研究进展
2.3 昆虫卵形成中细胞凋亡
2.4 昆虫细胞凋亡基因
3. 昆虫体内微生物垂直传播
3.1 类酵母的垂直传播
3.2 病毒的垂直传播
3.3 Wolbachia的垂直传播
4. 灰飞虱防治研究进展
4.1 灰飞虱生物学特性
4.2 灰飞虱防治研究
第二章 共生菌Wolbachia对灰飞虱适合度的影响
1. 材料与方法
1.1 供试材料
1.2 供试材料的鉴定
1.3 产卵量及成虫寿命评估
1.4 发育历期评估
1.5 卵孵化率,雌性比例以及成熟后代比例评估
1.6 数据处理与分析
2. 结果与分析
2.1 灰飞虱体内Wolbachia鉴定
2.2 Wolbachia对灰飞虱适合度的影响
3. 讨论
第三章 共生菌Wolbachia对灰飞虱卵巢细胞凋亡的影响
1. 材料与方法
1.1 供试材料
1.2 供试材料的收集
1.3 荧光原位杂交
1.4 TUNEL检测
1.5 Western-blot检测
1.6 酶活力检测
1.7 数据处理与分析
2. 结果与分析
2.1 灰飞虱卵巢细胞凋亡
2.2 Caspase-3-like蛋白Western-blot检测
2.3 Caspase-3-like蛋白酶活
3. 讨论
第四章 抑制剂对灰飞虱卵巢细胞凋亡的影响
1. 材料与方法
1.1 供试材料的采集与鉴定
1.2 供试材料的饲养
1.3 样品收集
1.4 灰飞虱RNA提取
1.5 cDNA的合成
1.6 SYBR Green荧光定量RT-qPCR检测
2. 结果与分析
2.1 抑制剂对灰飞虱产卵量的影响
2.2 抑制剂对caspase-3-like以及Vg表达量的影响
2.3 抑制剂对caspase-3-like酶活力的影响
3. 讨论
第五章 灰飞虱细胞凋亡caspase基因
1. 材料与方法
1.1 供试材料的采集与鉴定
1.2 供试材料的收集
1.3 细胞凋亡基因克隆
1.4 细胞凋亡基因初级结构分析
1.5 Caspase基因表达水平
1.6 dscas-RNA合成及显微注射
1.7 数据处理与分析
2. 结果与分析
2.1 Caspase基因克隆结果
2.2 Caspase基因初级结构分析
2.3 不同发育阶段灰飞虱caspase基因表达水平
2.4 RNAi干扰caspase基因对灰飞虱产卵量的影响
3. 讨论
第六章 共生菌Wolbachia在灰飞虱卵巢中的定位
1. 材料与方法
1.1 供试材料的采集与鉴定
1.2 供试材料的收集
1.3 荧光定量RT-qPCR检测
1.4 荧光定量qPCR检测
1.5 免疫组化
1.6 Vg基因干扰
1.7 数据处理与分析
2. 结果与分析
2.1 灰飞虱卵巢内Wolbachia滴度及Vg表达水平
2.2 灰飞虱卵巢内Wolbachia的分布
2.3 dsVg对卵巢中Wolbachia定位的影响
2.4 Wolbachia在卵巢中的转移路径
3. 讨论
第七章 总结与讨论
1. 全文总结与讨论
2. 下一步研究方向
3. 本研究创新点
参考文献
附录
在读期间论文发表及奖励情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]利用dsRNA体外饲喂和转基因水稻饲喂抑制褐飞虱相关基因的研究[J]. 陆琳,陈秋红,林拥军. 农业生物技术学报. 2013(09)
[2]盐城地区灰飞虱发生情况调查研究[J]. 陈元洲,张亚,司真真,张大友. 现代农业科技. 2013(14)
[3]稻飞虱灾变和治理研究透析[J]. 吕进,祝增荣,娄永根,程家安. 应用昆虫学报. 2013(03)
[4]中国水稻条纹叶枯病研究进展[J]. 周益军,李硕,程兆榜,周彤,范永坚. 江苏农业学报. 2012(05)
[5]意大利蜜蜂胚后发育过程中中肠上皮组织细胞的更替[J]. 李兆英. 昆虫学报. 2011(10)
[6]江苏省近年来新发生的一种水稻矮缩病害病原初步鉴定[J]. 季英华,任春梅,程兆榜,周彤,周益军. 江苏农业学报. 2009(06)
[7]昆虫中分离与鉴定的caspase及其作用[J]. 郭素英,舒端阳,彭建新,洪华珠. 昆虫知识. 2009(05)
[8]金坛地区灰飞虱发生动态研究[J]. 孙国俊,蒋林忠,董波,季敏,李粉华. 江西农业学报. 2008(09)
[9]昆虫细胞程序性死亡的研究进展[J]. 刘凯于,邓玉杰,张许平,彭建新,李毅,洪华珠. 昆虫学报. 2008(06)
[10]温度对灰飞虱生物学特性的影响[J]. 张爱民,刘向东,翟保平,顾晓莹. 昆虫学报. 2008(06)
硕士论文
[1]不同地理种群灰飞虱生态学特性的比较研究[D]. 侯文杰.南京农业大学 2013
[2]灰飞虱的发生规律及滞育特性研究[D]. 贺媛.南京农业大学 2010
本文编号：3203718
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：163 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1. 共生菌Wolbachia的研究进展
1.1 Wolbachia对寄主的调控作用
1.2 Wolbachia对寄主生殖调控作用
2. 细胞程序性死亡
2.1 细胞程序性死亡的研究进展
2.2 昆虫细胞凋亡的研究进展
2.3 昆虫卵形成中细胞凋亡
2.4 昆虫细胞凋亡基因
3. 昆虫体内微生物垂直传播
3.1 类酵母的垂直传播
3.2 病毒的垂直传播
3.3 Wolbachia的垂直传播
4. 灰飞虱防治研究进展
4.1 灰飞虱生物学特性
4.2 灰飞虱防治研究
第二章 共生菌Wolbachia对灰飞虱适合度的影响
1. 材料与方法
1.1 供试材料
1.2 供试材料的鉴定
1.3 产卵量及成虫寿命评估
1.4 发育历期评估
1.5 卵孵化率,雌性比例以及成熟后代比例评估
1.6 数据处理与分析
2. 结果与分析
2.1 灰飞虱体内Wolbachia鉴定
2.2 Wolbachia对灰飞虱适合度的影响
3. 讨论
第三章 共生菌Wolbachia对灰飞虱卵巢细胞凋亡的影响
1. 材料与方法
1.1 供试材料
1.2 供试材料的收集
1.3 荧光原位杂交
1.4 TUNEL检测
1.5 Western-blot检测
1.6 酶活力检测
1.7 数据处理与分析
2. 结果与分析
2.1 灰飞虱卵巢细胞凋亡
2.2 Caspase-3-like蛋白Western-blot检测
2.3 Caspase-3-like蛋白酶活
3. 讨论
第四章 抑制剂对灰飞虱卵巢细胞凋亡的影响
1. 材料与方法
1.1 供试材料的采集与鉴定
1.2 供试材料的饲养
1.3 样品收集
1.4 灰飞虱RNA提取
1.5 cDNA的合成
1.6 SYBR Green荧光定量RT-qPCR检测
2. 结果与分析
2.1 抑制剂对灰飞虱产卵量的影响
2.2 抑制剂对caspase-3-like以及Vg表达量的影响
2.3 抑制剂对caspase-3-like酶活力的影响
3. 讨论
第五章 灰飞虱细胞凋亡caspase基因
1. 材料与方法
1.1 供试材料的采集与鉴定
1.2 供试材料的收集
1.3 细胞凋亡基因克隆
1.4 细胞凋亡基因初级结构分析
1.5 Caspase基因表达水平
1.6 dscas-RNA合成及显微注射
1.7 数据处理与分析
2. 结果与分析
2.1 Caspase基因克隆结果
2.2 Caspase基因初级结构分析
2.3 不同发育阶段灰飞虱caspase基因表达水平
2.4 RNAi干扰caspase基因对灰飞虱产卵量的影响
3. 讨论
第六章 共生菌Wolbachia在灰飞虱卵巢中的定位
1. 材料与方法
1.1 供试材料的采集与鉴定
1.2 供试材料的收集
1.3 荧光定量RT-qPCR检测
1.4 荧光定量qPCR检测
1.5 免疫组化
1.6 Vg基因干扰
1.7 数据处理与分析
2. 结果与分析
2.1 灰飞虱卵巢内Wolbachia滴度及Vg表达水平
2.2 灰飞虱卵巢内Wolbachia的分布
2.3 dsVg对卵巢中Wolbachia定位的影响
2.4 Wolbachia在卵巢中的转移路径
3. 讨论
第七章 总结与讨论
1. 全文总结与讨论
2. 下一步研究方向
3. 本研究创新点
参考文献
附录
在读期间论文发表及奖励情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]利用dsRNA体外饲喂和转基因水稻饲喂抑制褐飞虱相关基因的研究[J]. 陆琳,陈秋红,林拥军. 农业生物技术学报. 2013(09)
[2]盐城地区灰飞虱发生情况调查研究[J]. 陈元洲,张亚,司真真,张大友. 现代农业科技. 2013(14)
[3]稻飞虱灾变和治理研究透析[J]. 吕进,祝增荣,娄永根,程家安. 应用昆虫学报. 2013(03)
[4]中国水稻条纹叶枯病研究进展[J]. 周益军,李硕,程兆榜,周彤,范永坚. 江苏农业学报. 2012(05)
[5]意大利蜜蜂胚后发育过程中中肠上皮组织细胞的更替[J]. 李兆英. 昆虫学报. 2011(10)
[6]江苏省近年来新发生的一种水稻矮缩病害病原初步鉴定[J]. 季英华,任春梅,程兆榜,周彤,周益军. 江苏农业学报. 2009(06)
[7]昆虫中分离与鉴定的caspase及其作用[J]. 郭素英,舒端阳,彭建新,洪华珠. 昆虫知识. 2009(05)
[8]金坛地区灰飞虱发生动态研究[J]. 孙国俊,蒋林忠,董波,季敏,李粉华. 江西农业学报. 2008(09)
[9]昆虫细胞程序性死亡的研究进展[J]. 刘凯于,邓玉杰,张许平,彭建新,李毅,洪华珠. 昆虫学报. 2008(06)
[10]温度对灰飞虱生物学特性的影响[J]. 张爱民,刘向东,翟保平,顾晓莹. 昆虫学报. 2008(06)
硕士论文
[1]不同地理种群灰飞虱生态学特性的比较研究[D]. 侯文杰.南京农业大学 2013
[2]灰飞虱的发生规律及滞育特性研究[D]. 贺媛.南京农业大学 2010
本文编号：3203718
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/nykjbs/3203718.html
