1型鸭肝炎强毒对成鸭致
发布时间：2022-08-02 20:16
1型鸭肝炎病毒（Duck Hepatitis A virus type 1,DHAV-1）是引起雏鸭病毒性肝炎的重要病原,对雏鸭致死率高,而对成年鸭感染无明显临床症状,但系统评估其对成年鸭致病性、体内分布及诱导免疫发生特性等数据较为缺乏,围绕这些科学问题开展系列研究,主要结果如下:1 1型鸭肝炎强毒感染诱发成年鸭急性和慢性肝炎DHAV-1强毒感染160日龄成年鸭,无临床症状。qRT-PCR检测血液病毒持续感染196 d,引起病毒血症的发生。DHAV-1感染后2-10 d,肝脏病毒RNA和3D蛋白阳性,病毒快速复制增殖含量达到10~7.18.18 copies/g;肝脏病理检测结果显示肝细胞嗜酸性变性并有炎性细胞浸润;血清肝功能指标检测显示ALT、AST和Tbil含量升高,具有急性肝炎的特征。肝脏内病毒持续感染252 d,且在10-252 d肝脏纤维组织增生且伴有肝细胞坏死、脂肪变性、空泡形成和大量炎性细胞浸润等病变;感染后140 d AST>ALT,且白蛋白和白球蛋白比持续降低,提示肝功能持续损伤,具有慢性肝炎的特征。血液和肝脏模式识别受体（PRRs）、白介素（ILs）、干扰素（...
【文章页数】：133 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
常用英文缩写词汇
第一章 文献综述
1.1 1型鸭肝炎概述
1.1.1 病毒分类
1.1.2 病原学和基因组结构
1.1.3 流行特点
1.1.4 体内分布特点
1.1.5 致病特点
1.1.6 防治措施
1.2 鸭抗病毒免疫研究概述
1.2.1 鸭抗病毒先天性免疫
1.2.2 鸭抗病毒适应性免疫
1.2.3 DHAV-1 感染诱导鸭免疫应答研究进展
1.3 选题目的及意义
第二章 1型鸭肝炎强毒感染诱发成年鸭急性和慢性肝炎
2.1 实验材料
2.1.1 病毒
2.1.2 实验动物
2.1.3 试剂与设备
2.2 实验方法
2.2.1 试验设计
2.2.2 样品采集和处理
2.2.3 RNA的提取
2.2.4 c DNA的制备
2.2.5 一步法实时荧光定量检测样品DHAV-1 RNA拷贝数
2.2.6 相对荧光定量检测肝脏和血液免疫相关因子的转录水平
2.2.7 DHAV-1 诱导血清特异性抗体IgG、IgM和 IgA1 产生规律
2.2.8 流式细胞术检测肝脏DHAV-1 特异性CD4+和CD8+T 细胞
2.2.9 组织病理学检测
2.2.10 免疫组织化学法检测肝脏内DHAV-13D蛋白的分布
2.2.11 数据统计和分析
2.3 结果与分析
2.3.1 DHAV-1 感染成年鸭的临床和剖检症状
2.3.2 DHAV-1 在肝脏和血液的感染和增殖规律
2.3.3 DHAV-1 感染诱发急性和慢性肝炎
2.3.4 DHAV-1 诱导血清特异性Ig G、Ig M和 Ig A1 抗体的产生规律
2.3.5 DHAV-1 诱导肝脏内特异性T淋巴细胞反应
2.3.6 DHAV-1 诱导血液和肝脏先天性免疫应答反应
2.3.7 DHAV-1 与血液和肝脏免疫应答的相互作用
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 1型鸭肝炎强毒肾脏分布特性与持续性感染的形成
3.1 实验材料
3.1.1 病毒
3.1.2 实验动物
3.1.3 试剂与设备
3.2 实验方法
3.2.1 实验设计
3.2.2 样品采集和处理
3.2.3 RNA的提取
3.2.4 c DNA的制备
3.2.5 一步法实时荧光定量检测DHAV-1 RNA拷贝数
3.2.6 相对荧光定量检测肾脏免疫相关因子的转录水平
3.2.7 组织病理学检测
3.2.8 免疫组织化学法检测DHAV-1 在肾脏的分布特点
3.2.9 免疫组织化学法检测肾脏特异性CD4/CD8+T 细胞的动态分布
3.2.10 数据分析
3.3 结果与分析
3.3.1 DHAV-1 在成年鸭肾脏的感染和分布特点
3.3.2 DHAV-1 感染引起肾脏的病理损伤
3.3.3 DHAV-1 诱导肾脏T细胞免疫应答特性
3.3.4 DHAV-1 诱导肾脏先天性免疫应答反应特性
3.3.5 DHAV-1 与肾脏免疫相关因子的相互作用关系
3.4 讨论
3.5 小结
第四章 1型鸭肝炎强毒对淋巴器官的组织嗜性
4.1 实验材料
4.1.1 病毒
4.1.2 实验动物
4.1.3 试剂与设备
4.2 实验方法
4.2.1 实验设计
4.2.2 样品采集和处理
4.2.3 RNA的提取
4.2.4 c DNA的制备
4.2.5 实时荧光定量检测DHAV-1 RNA拷贝数
4.2.6 相对荧光定量检测淋巴器官免疫相关因子的转录水平
4.2.7 免疫组织化学法检测DHAV-1 在淋巴器官的分布
4.2.8 数据分析
4.3 结果与分析
4.3.1 DHAV-1 在淋巴组织的感染特点
4.3.2 DHAV-1 诱导模式识别受体的转录变化
4.3.3 DHAV-1 诱导干扰素的转录变化
4.3.4 DHAV-1 诱导白介素的转录变化
4.3.5 DHAV-1 诱导MHC和 BAFF的转录变化
4.3.6 DHAV-1 诱导趋化因子和β-防御素的转录变化
4.3.7 DHAV-1 与淋巴器官免疫相关因子的相互作用关系
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 1型鸭肝炎强毒感染消化系统特点及诱导黏膜免疫
5.1 实验材料
5.1.1 病毒
5.1.2 实验动物
5.1.3 试剂与设备
5.2 实验方法
5.2.1 实验设计
5.2.2 样品采集和处理
5.2.3 RNA的提取
5.2.4 荧光定量检测DHAV-1 RNA拷贝数
5.2.5 间接ELISA检测胆汁特异性IgG、IgM和 IgA
5.2.6 间接ELISA检测分泌液特异性IgG、IgM和 IgA
5.2.7 免疫组织化学法检测IgA+细胞
5.2.8 数据分析
5.3 结果与分析
5.3.1 DHAV-1 在胰腺、食管和肠道的感染和分布规律
5.3.2 DHAV-1 诱导胆汁特异性抗体IgG、IgM和 IgA的产生规律
5.3.3 DHAV-1 诱导食管特异性抗体IgG、IgM和 IgA的分泌规律
5.3.4 DHAV-1 诱导肠道特异性抗体IgG、IgM和 IgA的分泌规律
5.3.5 DHAV-1 诱导食管IgA+细胞的分布
5.3.6 DHAV-1 诱导肠道IgA+细胞的分布
5.4 讨论
5.5 小结
第六章 1型鸭肝炎强毒感染生殖系统特点及诱导黏膜免疫
6.1 实验材料
6.1.1 病毒
6.1.2 实验动物
6.1.3 试剂与设备
6.2 实验方法
6.2.1 实验设计
6.2.2 样品采集和处理
6.2.3 RNA的提取
6.2.4 荧光定量检测DHAV-1 RNA拷贝数
6.2.5 间接ELISA检测生殖系统分泌液特异性IgG、IgM和 IgA
6.2.6 免疫组化法检测生殖道IgA+细胞
6.2.7 数据分析
6.3 结果与分析
6.3.1 DHAV-1 在生殖系统的感染和分布规律
6.3.2 DHAV-1 诱导生殖系统分泌液特异性IgG的产生
6.3.3 DHAV-1 诱导生殖系统分泌液特异性IgM的产生
6.3.4 DHAV-1 诱导生殖系统分泌液特异性IgA的产生
6.3.5 DHAV-1 诱导生殖道IgA+细胞的分布
6.4 讨论
6.5 小结
结论
论文创新点
参考文献
致谢
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭病毒性肝炎的防治[J]. 梁耀珍. 畜禽业. 2018(06)
[2]鸭1型甲肝病毒亚型的鉴定[J]. 傅秋玲,陈珍,黄瑜,傅光华,陈翠腾,万春和,程龙飞,陈红梅,施少华,林建生. 中国兽医杂志. 2015(07)
[3]1型鸭肝炎病毒强毒株在雏鸭体内分布情况研究[J]. 赵丽丽,刘海燕,牛银杰,祝明皓,刘胜旺,陈洪岩. 实验动物科学. 2015(03)
[4]感染鸭乙型肝炎病毒鸭外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞水平变化[J]. 聂云天,刘伯阳,王琪. 实用肝脏病杂志. 2015(03)
[5]鸭坦布苏病毒感染对鸭T淋巴细胞转化功能的影响[J]. 陈翠腾,苏荣茂,黄瑜,傅光华,程龙飞,陈红梅,万春和,傅秋玲,施少华,林建生. 福建农业学报. 2014(11)
[6]丙型肝炎病毒感染者的早期肾损伤监测[J]. 姚玉华,李美忠,史伟峰,姜庆波. 徐州医学院学报. 2012 (09)
[7]鸭甲型病毒性肝炎的研究进展[J]. 任丽倩,李晶,毕玉海,陈璨,张大丙,刘文军. 生物工程学报. 2012(07)
[8]雏鸭感染鸭病毒性肝炎的组织病理学观察[J]. 伍莉,朱周福. 中国兽医杂志. 2011(05)
[9]鸡SIgA的纯化鉴定及免疫小鼠效果的观察[J]. 王文强,龙塔,黄小东,岳峰,贾文科,王选年. 河南农业科学. 2009(10)
[10]鸭胆汁中高纯度分泌型免疫球蛋白A制备[J]. 杨晓燕,周霞,汪铭书,齐雪峰,程安春. 大理学院学报. 2009(08)
博士论文
[1]鸭瘟强、弱毒株在感染鸭体内的动态分布及免疫应答[D]. 齐雪峰.四川农业大学 2008
[2]急性肝坏死时肠道SIgA变化机制的研究[D]. 刘冬妍.中国医科大学 2006
硕士论文
[1]鸭甲肝病毒1和3型一步法双重RT-PCR检测方法的建立及应用[D]. 文兴建.四川农业大学 2015
[2]鸭病毒性肝炎弱毒活疫苗临床免疫试验研究[D]. 何庆雄.四川农业大学 2010
[3]MDRV与H9AIV协同感染对番鸭细胞免疫机能的影响[D]. 高春亮.福建农林大学 2010
[4]鸭肝炎病毒感染樱桃谷雏鸭和中鸭后免疫病理学的动态研究[D]. 赵晓娜.华中农业大学 2008
[5]鸭肝炎病毒人工感染雏鸭病理发展规律及免疫组化与免疫荧光检测病原侵染规律的研究[D]. 陈海军.四川农业大学 2007
[6]鸭肝炎病毒免疫种鸭抗体消长规律及其雏鸭母源抗体变化的研究[D]. 樊景凤.东北农业大学 2000
本文编号：3669175
【文章页数】：133 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
常用英文缩写词汇
第一章 文献综述
1.1 1型鸭肝炎概述
1.1.1 病毒分类
1.1.2 病原学和基因组结构
1.1.3 流行特点
1.1.4 体内分布特点
1.1.5 致病特点
1.1.6 防治措施
1.2 鸭抗病毒免疫研究概述
1.2.1 鸭抗病毒先天性免疫
1.2.2 鸭抗病毒适应性免疫
1.2.3 DHAV-1 感染诱导鸭免疫应答研究进展
1.3 选题目的及意义
第二章 1型鸭肝炎强毒感染诱发成年鸭急性和慢性肝炎
2.1 实验材料
2.1.1 病毒
2.1.2 实验动物
2.1.3 试剂与设备
2.2 实验方法
2.2.1 试验设计
2.2.2 样品采集和处理
2.2.3 RNA的提取
2.2.4 c DNA的制备
2.2.5 一步法实时荧光定量检测样品DHAV-1 RNA拷贝数
2.2.6 相对荧光定量检测肝脏和血液免疫相关因子的转录水平
2.2.7 DHAV-1 诱导血清特异性抗体IgG、IgM和 IgA1 产生规律
2.2.8 流式细胞术检测肝脏DHAV-1 特异性CD4+和CD8+T 细胞
2.2.9 组织病理学检测
2.2.10 免疫组织化学法检测肝脏内DHAV-13D蛋白的分布
2.2.11 数据统计和分析
2.3 结果与分析
2.3.1 DHAV-1 感染成年鸭的临床和剖检症状
2.3.2 DHAV-1 在肝脏和血液的感染和增殖规律
2.3.3 DHAV-1 感染诱发急性和慢性肝炎
2.3.4 DHAV-1 诱导血清特异性Ig G、Ig M和 Ig A1 抗体的产生规律
2.3.5 DHAV-1 诱导肝脏内特异性T淋巴细胞反应
2.3.6 DHAV-1 诱导血液和肝脏先天性免疫应答反应
2.3.7 DHAV-1 与血液和肝脏免疫应答的相互作用
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 1型鸭肝炎强毒肾脏分布特性与持续性感染的形成
3.1 实验材料
3.1.1 病毒
3.1.2 实验动物
3.1.3 试剂与设备
3.2 实验方法
3.2.1 实验设计
3.2.2 样品采集和处理
3.2.3 RNA的提取
3.2.4 c DNA的制备
3.2.5 一步法实时荧光定量检测DHAV-1 RNA拷贝数
3.2.6 相对荧光定量检测肾脏免疫相关因子的转录水平
3.2.7 组织病理学检测
3.2.8 免疫组织化学法检测DHAV-1 在肾脏的分布特点
3.2.9 免疫组织化学法检测肾脏特异性CD4/CD8+T 细胞的动态分布
3.2.10 数据分析
3.3 结果与分析
3.3.1 DHAV-1 在成年鸭肾脏的感染和分布特点
3.3.2 DHAV-1 感染引起肾脏的病理损伤
3.3.3 DHAV-1 诱导肾脏T细胞免疫应答特性
3.3.4 DHAV-1 诱导肾脏先天性免疫应答反应特性
3.3.5 DHAV-1 与肾脏免疫相关因子的相互作用关系
3.4 讨论
3.5 小结
第四章 1型鸭肝炎强毒对淋巴器官的组织嗜性
4.1 实验材料
4.1.1 病毒
4.1.2 实验动物
4.1.3 试剂与设备
4.2 实验方法
4.2.1 实验设计
4.2.2 样品采集和处理
4.2.3 RNA的提取
4.2.4 c DNA的制备
4.2.5 实时荧光定量检测DHAV-1 RNA拷贝数
4.2.6 相对荧光定量检测淋巴器官免疫相关因子的转录水平
4.2.7 免疫组织化学法检测DHAV-1 在淋巴器官的分布
4.2.8 数据分析
4.3 结果与分析
4.3.1 DHAV-1 在淋巴组织的感染特点
4.3.2 DHAV-1 诱导模式识别受体的转录变化
4.3.3 DHAV-1 诱导干扰素的转录变化
4.3.4 DHAV-1 诱导白介素的转录变化
4.3.5 DHAV-1 诱导MHC和 BAFF的转录变化
4.3.6 DHAV-1 诱导趋化因子和β-防御素的转录变化
4.3.7 DHAV-1 与淋巴器官免疫相关因子的相互作用关系
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 1型鸭肝炎强毒感染消化系统特点及诱导黏膜免疫
5.1 实验材料
5.1.1 病毒
5.1.2 实验动物
5.1.3 试剂与设备
5.2 实验方法
5.2.1 实验设计
5.2.2 样品采集和处理
5.2.3 RNA的提取
5.2.4 荧光定量检测DHAV-1 RNA拷贝数
5.2.5 间接ELISA检测胆汁特异性IgG、IgM和 IgA
5.2.6 间接ELISA检测分泌液特异性IgG、IgM和 IgA
5.2.7 免疫组织化学法检测IgA+细胞
5.2.8 数据分析
5.3 结果与分析
5.3.1 DHAV-1 在胰腺、食管和肠道的感染和分布规律
5.3.2 DHAV-1 诱导胆汁特异性抗体IgG、IgM和 IgA的产生规律
5.3.3 DHAV-1 诱导食管特异性抗体IgG、IgM和 IgA的分泌规律
5.3.4 DHAV-1 诱导肠道特异性抗体IgG、IgM和 IgA的分泌规律
5.3.5 DHAV-1 诱导食管IgA+细胞的分布
5.3.6 DHAV-1 诱导肠道IgA+细胞的分布
5.4 讨论
5.5 小结
第六章 1型鸭肝炎强毒感染生殖系统特点及诱导黏膜免疫
6.1 实验材料
6.1.1 病毒
6.1.2 实验动物
6.1.3 试剂与设备
6.2 实验方法
6.2.1 实验设计
6.2.2 样品采集和处理
6.2.3 RNA的提取
6.2.4 荧光定量检测DHAV-1 RNA拷贝数
6.2.5 间接ELISA检测生殖系统分泌液特异性IgG、IgM和 IgA
6.2.6 免疫组化法检测生殖道IgA+细胞
6.2.7 数据分析
6.3 结果与分析
6.3.1 DHAV-1 在生殖系统的感染和分布规律
6.3.2 DHAV-1 诱导生殖系统分泌液特异性IgG的产生
6.3.3 DHAV-1 诱导生殖系统分泌液特异性IgM的产生
6.3.4 DHAV-1 诱导生殖系统分泌液特异性IgA的产生
6.3.5 DHAV-1 诱导生殖道IgA+细胞的分布
6.4 讨论
6.5 小结
结论
论文创新点
参考文献
致谢
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭病毒性肝炎的防治[J]. 梁耀珍. 畜禽业. 2018(06)
[2]鸭1型甲肝病毒亚型的鉴定[J]. 傅秋玲,陈珍,黄瑜,傅光华,陈翠腾,万春和,程龙飞,陈红梅,施少华,林建生. 中国兽医杂志. 2015(07)
[3]1型鸭肝炎病毒强毒株在雏鸭体内分布情况研究[J]. 赵丽丽,刘海燕,牛银杰,祝明皓,刘胜旺,陈洪岩. 实验动物科学. 2015(03)
[4]感染鸭乙型肝炎病毒鸭外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞水平变化[J]. 聂云天,刘伯阳,王琪. 实用肝脏病杂志. 2015(03)
[5]鸭坦布苏病毒感染对鸭T淋巴细胞转化功能的影响[J]. 陈翠腾,苏荣茂,黄瑜,傅光华,程龙飞,陈红梅,万春和,傅秋玲,施少华,林建生. 福建农业学报. 2014(11)
[6]丙型肝炎病毒感染者的早期肾损伤监测[J]. 姚玉华,李美忠,史伟峰,姜庆波. 徐州医学院学报. 2012 (09)
[7]鸭甲型病毒性肝炎的研究进展[J]. 任丽倩,李晶,毕玉海,陈璨,张大丙,刘文军. 生物工程学报. 2012(07)
[8]雏鸭感染鸭病毒性肝炎的组织病理学观察[J]. 伍莉,朱周福. 中国兽医杂志. 2011(05)
[9]鸡SIgA的纯化鉴定及免疫小鼠效果的观察[J]. 王文强,龙塔,黄小东,岳峰,贾文科,王选年. 河南农业科学. 2009(10)
[10]鸭胆汁中高纯度分泌型免疫球蛋白A制备[J]. 杨晓燕,周霞,汪铭书,齐雪峰,程安春. 大理学院学报. 2009(08)
博士论文
[1]鸭瘟强、弱毒株在感染鸭体内的动态分布及免疫应答[D]. 齐雪峰.四川农业大学 2008
[2]急性肝坏死时肠道SIgA变化机制的研究[D]. 刘冬妍.中国医科大学 2006
硕士论文
[1]鸭甲肝病毒1和3型一步法双重RT-PCR检测方法的建立及应用[D]. 文兴建.四川农业大学 2015
[2]鸭病毒性肝炎弱毒活疫苗临床免疫试验研究[D]. 何庆雄.四川农业大学 2010
[3]MDRV与H9AIV协同感染对番鸭细胞免疫机能的影响[D]. 高春亮.福建农林大学 2010
[4]鸭肝炎病毒感染樱桃谷雏鸭和中鸭后免疫病理学的动态研究[D]. 赵晓娜.华中农业大学 2008
[5]鸭肝炎病毒人工感染雏鸭病理发展规律及免疫组化与免疫荧光检测病原侵染规律的研究[D]. 陈海军.四川农业大学 2007
[6]鸭肝炎病毒免疫种鸭抗体消长规律及其雏鸭母源抗体变化的研究[D]. 樊景凤.东北农业大学 2000
本文编号：3669175
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