芸薹黄化病毒P0蛋白与本生烟蛋白NbSKPl和NbRAF2的互作研究

发布时间：2023-09-02 10:33

　　RNA沉默是植物自身免受病毒侵染的一种有效和通用的机制,而植物病毒为逃避该机制进化出了不同的反防御策略,其中最为有效的是编码RNA沉默抑制子(Viral suppressor of RNA silencing,VSR)。马铃薯卷叶病毒属病毒(poleroviruses)在世界范围内发生分布,侵染很多具有经济重要性的作物,引起严重病害。该属病毒编码的P0蛋白是VSR,不同成员的P0在序列和抑制子功能上存在差异。PO具有保守的类F-box基序(F-box-like motif),并且F-box-like motif是P0抑制子活性及P0与SKP1互作必不可少的因素,而最新研究表明马铃薯卷叶病毒内蒙分离物编码的沉默抑制子P0蛋白具有保守的F-box-like motif,却不能与SKP1互作。目前P0与SKP1的互作在沉默抑制中的作用仍存在争议。同时,目前关于P0蛋白与寄主蛋白互作的报道极少。因此,本论文在已有基础上,主要围绕芸薹黄化病毒基因型A(Brassica yellows virus genotype A,BrYV-A)P0蛋白,进一步研究了P0BrA发挥功能的关键氨基酸区域及位点,...

【文章页数】：124 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
缩略词
第一章 文献综述
    1.1 RNA沉默
    1.2 马铃薯卷叶病毒属P0蛋白研究进展
    1.3 叶绿体在植物免疫中的作用
    1.4 叶绿体与植物病毒的互作
    1.5 二磷酸核酮糖羧化酶组装因子2(RAF2)蛋白研究概况
    1.6 本论文研究意义与目的
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 溶液和培养基的配制
    2.3 具体实验所用试剂及配制
    2.4 实验方法
第三章 BrYV P0与NbSKP1互作机制研究
    3.1 P0^BrA蛋白部分关键氨棊酸定位
    3.2 P0^BrA突变体与NbSKP1互作验证
    3.3 P0^BrA和NbSKP1互作不是P0^BrA抑制活性所必需的
    3.4 P0^BrA介导AGO1的降解不依赖于P0-NbSKP1的互作
    3.5 P0^BrA突变体LP可通过26S蛋白酶体途径降解
    3.6 突变体LPKs活性分析
    3.7 本章小结与讨论
第四章 BrYV-A P0蛋白与NbRAF2互作机制研究
    4.1 本生烟NbRAF2的克隆及功能分析
    4.2 P0^BrA蛋白与本生烟NbRAF2蛋白互作
    4.3 P0^BrA表达时NbRAF2的亚细胞定位
    4.4 P0^BrA抑制NbRAF2在细胞核中积累需要NbRAF2叶绿体和细胞核双重定位
    4.5 P0^BrA抑制NbRAF2在细胞核中积累不依赖于P0^BrA VSR、致坏死和与SKP1互作功能
    4.6 BrYV-A侵染抑制NbRAF2在细胞核中积累
    4.7 沉默NbRAF2促进BrYV-A侵染
    4.8 超表达细胞核中的RAF2蛋白增强对BrYV-A的抗性
    4.9 小结与讨论
第五章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
附录Ⅰ P0^BrA突变体功能汇总
附录Ⅱ 引物列表
个人简历



本文编号：3845043