SIRT1通路在大鼠脑出血继发性线粒体功能障碍及神经细胞凋亡中的保护作用及机制研究

发布时间：2018-04-14 10:37

  本文选题：SIRT1 + PGC-1Α　； 参考：《重庆医科大学》2017年博士论文

【摘要】：背景脑出血((intracerebralhemorrhage,ICH)是中老年人常见的急性脑血管疾病,具有高病死率和高致残率,是我国脑血管疾病中死亡率最高的临床类型。虽历经多年研究,但至今发病机制不甚清楚,治疗手段有限。近年来研究表明,血肿周围带能量代谢障碍在脑出血继发性损伤中起着重要的作用。脑出血后能量代谢原料的供应中断,引起能量代谢障碍能量物质匮乏,启动脑出血后的损伤级联反应。线粒体作为细胞有氧呼吸和能量供应的场所,其结构和功能受损与脑出血所引起的能量代谢障碍密切相关,同时线粒体功能障碍可启动线粒体凋亡途径诱导的细胞凋亡。由此可见线粒体功能障碍及其诱导的细胞凋亡可能是脑出血的重要致病机制,也有望成为治疗脑出血的重要靶点。越来越多研究显示,Silent information regulator 1(SIRT1)参与体内线粒体功能障碍的修复,并在多种神经退行性疾病中具有一定的神经保护作用。然而SIRT1在大鼠脑出血继发性损伤的保护作用及其可能的调控机制目前尚不清楚。目的探讨sirt1在大鼠脑出血继发性损伤中的神经保护作用及其可能的相关调控机制。方法(1)构建大鼠脑出血模型,于建模后腹腔注射sirt1激动剂srt17205mg/kg/d直至建模后48h。观察激动sirt1对大鼠脑出血后神经学功能、脑水肿含量、形态学的影响,并通过电子显微镜对血肿周围线粒体形态学的观察、线粒体atp和线粒体dna的测定评价激动sirt1对大鼠脑出后继发性线粒体功能障碍的神经保护作用。采用real-timeqpcr和westernblot检查sirt1在大鼠脑出血后核内及总蛋白的表达情况。同时通过westernblot检测ampk及p-ampk的表达情况。(2)于构建大鼠脑出血模型后激动sirt1,采用westernblot检测pgc-1α核内及总蛋白表达水平,线粒体电子传递链相关蛋白及凋亡相关蛋白的表达水平。同时采用免疫共沉淀(ip)检测乙酰化pgc-1α的表达水平。(3)构建一条化学合成的阴性对照sirna和三条pgc-1αsirna,建立大鼠脑出血模型,建模前24小时行侧脑室注射sirna,同时于建模后腹腔注射srt1720。采用real-timeqpcr和westernblot检测pgc-1αsirna干扰片段的干扰效率,并选出最有效的pgc-1αsirna干扰片段。检测pgc-1α基因干扰后线粒体电子传递链相关蛋白及线粒体凋亡途径相关蛋白的表达情况。(4)构建一条化学合成阴性对照sirna和三条sirt1sirna,建立大鼠脑出血模型,建模前24小时行侧脑室注射sirna。采用real-timeqpcr和westernblot检测sirt1sirna干扰片段的干扰效率,并选出最有效的sirt1sirna干扰片段。观察sirt1基因干扰后对大鼠脑出血后神经学功能、脑水肿含量、形态学的影响。通过电子显微镜检测血肿周围线粒体形态变化,同时测定线粒体atp和线粒体dna含量。westernblot检测pgc-1α、线粒体电子传递链相关蛋白及线粒体凋亡途径相关蛋白的表达。结果(1)激动sirt1明显缓解大鼠脑出血后神经功能缺失,减少大鼠脑含水量,减少神经细胞损伤,缓解线粒体水肿,增加线粒体atp含量及线粒体dna含量。激动sirt1可引起sirt1总蛋白、sirt1核内蛋白及mrna表达增加。诱导pgc-1α、去乙酰化pgc-1α及线粒体电子传递链相关蛋白表达增高,而凋亡途径相关蛋白表达降低。(2)干扰pgc-1α可抑制由srt1720诱导的pgc-1α及线粒体电子传递链相关蛋白表达增高,同时引起线粒体凋亡途径相关蛋白表达进一步增高。(3)干扰sirt1促进大鼠脑出血后神经功能缺失,增加大鼠脑含水量,增加神经细胞损伤,增加线粒体水肿,减少线粒体atp含量及线粒体dna含量。同时减少sirt1蛋白及mrna表达水平,抑制pgc-1α及线粒体电子传递链相关蛋白表达增高,增加凋亡途径相关蛋白表达。结论SIRT1通过恢复提高线粒体的生物合成(MB),减轻大鼠脑出血继发性线粒体功能障碍及神经细胞凋亡。此神经保护作用可能是通过PGC-1α线粒体途径实现。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R743.34

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 孙伟;脑出血血肿周围区的病理改变[J];中风与神经疾病杂志;2001年05期

2 张化彪,张苏明;脑出血模型[J];国外医学脑血管疾病分册;2002年06期

3 童丹;脑出血的治疗进展[J];卒中与神经疾病;2002年01期

4 武衡,黎杏群,唐涛,黄菊芳,罗杰坤,梁清华;脑溢安对脑出血大鼠脑源性神经营养因子蛋白表达的影响[J];湖南医科大学学报;2003年05期

5 胡书超,张祥建;脑出血后的神经细胞凋亡机制及治疗策略[J];国外医学(脑血管疾病分册);2004年07期

6 赵和荣;;脑出血100例临床特点与预防分析[J];临床和实验医学杂志;2007年08期

7 施建生;高志伟;柯开富;;脑出血后内源性神经干细胞的增殖[J];交通医学;2009年04期

8 张飞飞;陈玉英;王占祥;;脑出血干预相关因子研究进展[J];福建医科大学学报;2011年02期

9 陈志颖;殷小平;唐洲平;;内源性神经干细胞与脑出血[J];神经损伤与功能重建;2013年02期

10 王复新;燕飞;毕胜;侯丽淳;王昆祥;张军武;李培育;和梅;关雪莲;杨慧;;大鼠脑出血微创后行神经干细胞移植对其神经功能的影响[J];中风与神经疾病杂志;2013年11期

相关会议论文 前10条

1 王淑荣;;脑出血基础与临床研究的新进展[A];2009年全国微循环与血液流变学基础研究及临床应用学术研讨会专题报告及论文集[C];2009年

2 张在强;潘树茂;修春明;汤国太;王云波;陈鸿光;边玉松;李新钢;;人骨髓间充质干细胞移植治疗脑出血的实验研究[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

3 杨树旭;钱冲;李晓斌;石磊;宋正飞;王义荣;;脑出血后神经细胞再生的研究[A];2006年浙江省神经外科学术会议论文汇编[C];2006年

4 王玉波;吴珊;;睾酮与脑出血后肺损伤的相关性研究[A];贵州省医学会第八届神经病学年会论文集[C];2010年

5 韦红巧;李倩茗;;大鼠急性脑出血对肝脏和肾脏的影响[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年

6 杨树旭;钱聪;亓旭晨;叶红星;方兵;李新伟;牛焕江;孙伟军;朱先理;王义荣;;促红细胞生成素治疗脑出血的实验研究[A];2009年浙江省神经外科学术年会论文汇编[C];2009年

7 安立新;彭宇明;王保国;孙梅珍;袁芳;;停通气缺氧预处理对脑出血大鼠炎性介质和氧化物的影响[A];2008年中华医学会全国麻醉学术年会论文汇编[C];2008年

8 周慎;李勇敏;;瘫络通颗粒对脑出血家兔保护作用的影响[A];国家中医药管理局脑病重点研究室建设研讨会暨中风病科研成果推广交流会论文汇编[C];2010年

9 王淑荣;刘永泉;吴晓圆;;大鼠脑出血后血肿周围区神经元死亡的影响因素[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年

10 张礼均;邓聪颖;孟辉;林江凯;冯华;;家犬实验性额叶脑出血模型的建立[A];中国医师协会神经外科医师分会第二届全国代表大会论文汇编[C];2007年

相关重要报纸文章 前2条

1 衣晓峰 秦玉文;头针可治疗急性脑出血[N];中国医药报;2001年

2 曾凡新 董志 傅洁民;中性粒细胞弹性蛋白酶——神经保护的作用新靶点[N];中国医药报;2006年

相关博士学位论文 前10条

1 周翔;脑出血后CD47表达及其作用的实验研究[D];复旦大学;2013年

2 张清华;人脐带间充质干细胞移植对脑出血后细胞凋亡的影响[D];山东大学;2015年

3 蔡萍;重组ADAMTS13对脑出血后脑损伤和脑水肿的作用机制研究[D];复旦大学;2014年

4 解文菁;CD163对脑出血血肿及灶周组织的影响变化及其机制[D];吉林大学;2016年

5 朱军;靶向AQP4的RNAi对大鼠脑出血周围细胞凋亡影响[D];青岛大学;2016年

6 阳光;铁调素对脑出血后铁代谢及神经功能预后影响的研究[D];第三军医大学;2016年

7 陈敏;骨髓间充质干细胞对大鼠脑出血后血脑屏障的保护作用及机制研究[D];南方医科大学;2016年

8 周楷;Treg细胞通过IL-10/GSK3β/PTEN信号调节小胶质/巨噬细胞极化减轻脑出血炎症损伤[D];第三军医大学;2016年

9 王春喜;沉默信息调节因子1在实验性脑出血后继发性脑损伤中的作用研究[D];南京大学;2015年

10 王勇;miR-130a在脑出血后脑水肿及预后预测中的作用研究[D];华中科技大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 石鑫;血肿腔内注入神经生长因子治疗大鼠脑出血[D];河北医科大学;2015年

2 赵龙;不同吸氧时间高压氧治疗对脑出血大鼠血肿周围AQP4和SOD表达的影响[D];河北医科大学;2015年

3 刘辉;硫化氢减轻脑缺血后tPA导致的脑出血[D];苏州大学;2015年

4 赵瑞;金属铁螯合剂对脑出血后大鼠脑损伤的影响[D];山西医科大学;2015年

5 潘文才;磁感应相移谱技术检测脑出血的实验研究[D];第三军医大学;2015年

6 张双;单唾液酸四己糖神经节苷脂（GM1）对大鼠脑出血后PARP-1/AIF通路影响的实验研究[D];四川医科大学;2015年

7 邓婷;依达拉奉对大鼠脑出血后神经细胞凋亡及Caspase-3、PARP-1表达影响的实验研究[D];四川医科大学;2015年

8 李磊;NFATc4参与脑出血后的神经元凋亡[D];南通大学;2014年

9 张海旺;环孢菌素A通过结合CypD抑制mPTP开放对大鼠实验性脑出血的作用及其机制研究[D];四川医科大学;2015年

10 陈周青;膜联蛋白Annexin1对大鼠脑出血后血脑屏障损伤保护作用机制的实验研究[D];苏州大学;2016年

，

本文编号：1748975