胃癌腹膜转移中eIF4E调控的STEAP1促进胃癌进展

发布时间：2025-03-18 23:47

　　研究目的:胃癌作为一种恶性肿瘤,其患者经常发生转移,腹膜转移最为常见,但是其转移的确切机制仍不清楚,胃癌腹膜转移被认为是胃癌治疗的难题。此外,目前尚无治疗胃癌腹膜转移的标准方式,所以明确胃癌患者发生腹膜转移的机理非常必要,本文旨在探究胃癌发生腹膜转移过程中的重要分子STEAP1在胃癌中表达的调控机制及对胃癌进展的影响。研究方法:收集20名胃癌腹膜转移患者的癌及癌旁组织,并分离两种组织样本中的多聚核糖体,并进行qRT-PCR实验鉴定胃癌腹膜转移患者两种样本多聚核糖体中基因(上皮至间质转化过程(EMT)相关)的差异表达谱。蛋白酶体抑制剂MG-132处理HMrSv5细胞和MKN45细胞以抑制蛋白酶体降解。荧光素酶实验用于检测STEAP1的翻译调控机制。MNK抑制剂CGP57380处理MKN45细胞以抑制eIF4E磷酸化。细胞迁移通过Transwell迁移实验检测,细胞侵袭使用Transwell侵袭实验检测。建立异种种植瘤检测肿瘤生长能力变化。研究结果:通过比较胃癌腹膜转移患者的肿瘤组织和正常组织多聚核糖体的差异性变化,我们发现共49种差异表达的EMT相关基因,其中肿瘤组织多聚核糖体中30种基因...

【文章页数】：120 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1 胃癌腹膜扩散过程图[17]

目前关于胃癌患者出现腹膜转移的机制并不太清楚,Paget提出的“种子-土壤”学说阐释了胃癌出现腹膜转移机制的基本步骤,此学说认为脱落的癌细胞像是“种子”,转移部位的微环境像是“土壤”[35]。该理论主要认为来自原发部位的癌细胞像种子一样,在侵袭至腹膜组织时,由于腹膜独特的特点,为....

图2.STEAP1蛋白质拓扑结构、细胞定位及生理功能示意图。[48]

STEAP1基因是最早发现的家族成员,由5个外显子及4个内含子组成的,位于染色体7q21.13,STEAP1基因编码前列腺跨膜上皮1抗原蛋白,该蛋白共由339个氨基酸组成,其分子量是39.72kDa,该蛋白是一种细胞表面生物分子,在线粒体跨膜电子过程转移承担重要角色。STEAP1....

图1 胃癌腹膜转移患者中STEAP1表达水平受转录后调控

为证实STEAP1mRNA和蛋白质水平表达存在差异的原因,我们使用蛋白酶体抑制剂MG-132进行实验验证STEAP1蛋白是否通过翻译后调控机制被制备但被积极降解导致该结果。首先使用蛋白酶体抑制剂MG-132处理正常间皮细胞系HMrSV5和模拟腹膜转移的胃癌细胞系MKN45,然....

图2 STEAP1的表达在翻译起始阶段受到调控

为进一步证实STEAP1在胃癌腹膜转移患者肿瘤组织中mRNA和蛋白质水平表达存在差异的原因,接下来我们研究了翻译起始和翻译延伸对STEAP1表达特点的潜在贡献。我们将STEAP1mRNA的3’UTRs序列构建至RL-CMV-CXCR4-6x报告质粒中肾素荧光素酶序列下游区域....

本文编号：4036363