‘无粉白’百合雄蕊发育转录组和表达谱的分析及再生体系的建立

发布时间：2019-10-13 04:21

【摘要】：百合是观赏上重要的鲜切花之一,在世界范围内的花卉市场上占有重要的份额。但是百合花粉量大,百合花药硕大,敞开的花型使得百合花粉极易受到污染,同时也不可避免的污染其他花药。且人工摘除又费时费力,因此,培育出雄性不育百合有较大的现实经济价值及潜在育种价值。本研究以花药退化型雄性不育百合新品种'无粉白'及其重组自交系中有花粉百合为研究对象,利用转录组和表达谱对不用品系不同发育时期的花药进行研究,整理组装拼接得到转录本和差异基因,并与生物数据库进行功能分析。同时利用百合不同部位做外植体,进行愈伤组织和不定芽的诱导,以及根系的诱导,建立离体快速繁殖体系。本试验的主要研究材料为正常有粉雄蕊按大、中、小及无粉品种'无粉白'雄蕊按大、中、小分六个样品,主要结果如下:1.构建了百合花粉不同发育时期雄蕊混合样品文库,进行转录组测序。对原始数据处理,整理得到206942序列重叠群(contig)进而得到98551条转录本(transcript)。从头拼接得到 37699 条 Unigene,对得到的 Unigene 与 GO、KEGG、eggNOG、SwissProt经过聚类分析完成功能注释。2.对有花药百合和花药退化型百合不同发育时期雄蕊进行表达谱分析,共得到69,436,802条reads,通过整体质量评估,显示各样品基因的表达模式符合mRNA不均一性、冗余性的特征。所有时期所有样品差异表达基因数量为5597,并且样品间的表达差异趋势不随表达量大小变化而明显变化。随机选出某一个表达量有差异的基因,进行荧光定量验证,比较表达谱和荧光定量PCR的结果反映表达谱数据的有效性,进而推测出差异基因的功能,为后续百合分子生物学研究提供依据。3.以珠芽和花器官为外植体诱导愈伤组织、以鳞片为外植体诱导分化不定芽和诱导不定芽生根,建立百合再生体系。明确珠芽诱导添加2,4-D 1.mg·L~(-1) + KT O.1mg·L~(-1);花被愈伤诱导添加2,4-D 3.0 mg L~(-1)和KT0.5mg L~(-1);花丝愈伤组织诱导添加2,4-D3.0mg·L~(-1),和0.5mg·L~(-1)。鳞片不定芽诱导添加 6-BA2.Omg·L~(-1) 和 NAA0.2mg·L~(-1),1/2MS 添加 NAAO.1mg·L~(-1),IBAO.1 mg·L~(-1)生根质量好,移栽易成活。
【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S682.29
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本文编号：2548473