猪源产细菌素肠球菌的筛选与生物学特性研究

发布时间：2020-07-02 07:54

【摘要】：目前养猪业不合理饲养方式易导致多种疾病的产生,其中腹泻性疾病尤为突出。临床上大量使用抗生素不仅导致了细菌耐药性的产生,同时猪肉内残留的抗生素引发的食品安全问题也一直备受争议。而益生菌作为抗生素的替代品之一,可以避免这些问题的发生。其中肠球菌为国家指定饲料添加的益生菌之一,具有良好的耐受胃肠道环境的能力以及可生产性,所以本试验筛选益生性肠球菌为今后生态制剂的研发奠定基础。1、本试验从健康猪的直肠粪便中分离出59株细菌,通过对产肠毒素大肠杆菌的抑菌筛选,筛选出7株有明显抑菌活性的肠球菌,经过生化生理试验和16Sr RNA基因序列的扩增与测序鉴定结果显EFL01、EFL03、EFL05、EFL06、EFL07、EFL08为屎肠球菌,EFL09为粪肠球菌。2、对7株肠球菌进行了肠球菌素的筛选,结果显示EFL01含有ent.A和ent.P,EFL07含有ent.A,EFL08含有ent.P。3、对7株肠球菌进行了毒力基因和抗生素敏感性检测,毒力基因的检测结果显示EFL01含有efa Afm+;EFL03含有efa Afm+;EFL05含有efa Afm+、agg+;EFL06含有efa Afm+;EFL07含有efa Afm+、agg+;EFL08含有efa Afm+;EFL09含有efa Afs+、ace+、agg+。药物敏感性试验结果显示EFL01、EFL08对青霉素G、氨苄霉素、氯霉素、万古霉素、强力霉素、红霉素敏感;而对庆大霉素、利福平、四环霉素、环丙沙星、诺氟沙星表现耐药。动物急性毒性试验从体征观察、细菌易位和脏器指数方面来检测,结果显示EFL01为安全菌株,而EFL08有潜在危险。4、本试验对EFL01进行了生物学特性研究结果显示:结果显示,EFL01能耐受低p H、高浓度胆盐、消化蛋白酶,所以能顺利通过胃肠道;而且能耐受一定的高温和高铜。EFL01具有良好的生长特性在4h时屎肠球菌EFL01进入对数增长期,而10h后进入稳定期。
【学位授予单位】：江西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S852.61

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本文编号：2737939