铁皮石斛内生放线菌次级代谢产物生物活性研究

发布时间：2023-04-05 10:11

　　植物内生菌是丰富的微生物资源,放线菌是活性天然产物的重要产生菌,因此,植物内放线菌作为微生物资源开发具有很大潜能。铁皮石斛是一种珍贵的中药材,具有重要的生理活性,其内生放线菌与宿主之间可能会发生水平基因转移或基因重组,从而使内生放线菌产生与宿主相同或相似的生理活性物质。因此,本研究以铁皮石斛植物内生放线菌为研究对象,对其次级代谢产物生物活性进行了研究,主要研究内容及结果如下:本研究以河北省微生物多样性研究与应用实验室分离、保藏的13株铁皮石斛内生放线菌作为研究对象,首先对13株供试菌株进行系统发育分析,研究结果表明,13株供试菌株中,链霉菌属(Streptomyces)有6株,假诺卡氏属(Pseudonocardia)4株,分枝杆菌属(Mycobacterium)1株,分枝酸杆菌属(Mycolicibacter)1株,拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)1株,表明铁皮石斛内生放线菌物种多样性较丰富。对供试菌株的次级代谢产物进行α-葡萄糖苷酶、乳腺癌MCF-7细胞系、病原指示菌抑制活性测定实验,结果表明,有6株供试菌株表现出对α-葡萄糖苷酶50%以上的抑制活性,2株菌株对α-葡萄糖苷...

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 铁皮石斛
    1.2 植物内生菌
    1.3 植物内生放线菌研究进展
        1.3.1 植物内生放线菌多样性
        1.3.2 植物内生放线菌生物活性多样性
    1.4 铁皮石斛内生菌研究现状
    1.5 本研究的目的意义及内容
第二章 13株铁皮石斛内生放线菌系统发育分析
    2.1 实验材料
        2.1.1 供试菌株
        2.1.2 培养基
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 基因组DNA的提取
        2.2.2 16 S r RNA基因的扩增
    2.3 实验结果
        2.3.1 13 株内生放线菌16S r RNA基因PCR扩增结果:
        2.3.2 13 株内生放线菌种属系统发育分析结果
        2.3.3 13 株内生放线菌多样性分析
    2.4 本章小结
第三章 铁皮石斛内生放线菌活性测定
    3.1 实验材料
        3.1.1 供试材料
        3.1.2 培养基
        3.1.3 实验仪器
        3.1.4 实验试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 菌株的发酵和处理
        3.2.2 α-葡萄糖苷酶提取
        3.2.3 α-葡萄糖苷酶抑制率的测定
        3.2.4 乳腺癌MCF-7 肿瘤细胞抑制活性测定
        3.2.5 病原指示菌抑制活性测定
        3.2.6 活性菌株的次级代谢产物初步分析
    3.3 实验结果
        3.3.1 活性测定结果
        3.3.2 活性菌株次级代谢产物的初步分析
    3.4 本章小结
第四章 菌株205527 次级代谢产物的分离纯化
    4.1 实验材料
        4.1.1 供试内生放线菌菌株
        4.1.2 指示菌
        4.1.3 培养基
        4.1.4 实验仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 菌株的发酵和处理
        4.2.2 次级代谢产物分离纯化
        4.2.3 化合物的结构鉴定
    4.3 实验结果
        4.3.1 分离纯化结果
        4.3.2 纯化合物结构鉴定结果
    4.4 本章小结
第五章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间获得的研究成果



本文编号：3783227