核桃蛋白DPP-Ⅳ抑制肽的分离纯化及稳定性研究

发布时间：2022-12-08 01:15

　　采用5种商业蛋白酶水解核桃粕,评估水解物对二肽基肽酶4（DPP-Ⅳ）的抑制活性,优选出碱性蛋白酶作为水解用酶。研究确定了碱性蛋白酶水解核桃粕的最佳水解时间为5 h,然后通过超滤和SP Sephadex C-25阳离子交换树脂柱层析分离纯化碱性蛋白酶水解物得到核桃蛋白DPP-IV抑制肽,并对所得DPP-IV抑制肽的热稳定性、pH稳定性和模拟胃肠道消化稳定性进行了测试。结果表明,核桃蛋白DPP-IV抑制肽（0.25 mg/mL）DPP-Ⅳ抑制率（76.19%）比未分离纯化的水解物的提高了约3倍,其富含碱性氨基酸（含量34.36%）,尤其是精氨酸含量高达25.93%。核桃蛋白DPP-Ⅳ抑制肽在高温（121℃）、极端pH（pH 1.0和pH 11.0）和模拟胃肠道消化条件下,均显示出良好的稳定性,因此可用作控制血糖的功能性食品成分。 

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 原料与试剂
        1.1.2 仪器与设备
    1.2 实验方法
        1.2.1 核桃蛋白的酶法水解
        1.2.2 水解度的测定
        1.2.3 Tricine-SDS-PAGE分析
        1.2.4 DPP-Ⅳ抑制率的测定
        1.2.5 DPP-Ⅳ抑制肽的分离纯化
            1.2.5.1 超滤
            1.2.5.2 阳离子交换层析
        1.2.6 核桃蛋白DPP-Ⅳ抑制肽的稳定性分析
            1.2.6.1 热稳定性
            1.2.6.2 pH稳定性
            1.2.6.3 体外模拟胃肠道消化稳定性
        1.2.7 数据处理
2 结果与分析
    2.1 核桃蛋白酶法水解条件的确定
        2.1.1 蛋白酶的筛选
        2.1.2 水解时间的选择
    2.2 核桃蛋白DPP-IV抑制肽的分离纯化
        2.2.1 超滤分离组分的DPP-Ⅳ抑制活性
        2.2.2 阳离子交换层析各组分的DPP-IV抑制活性
    2.3 核桃蛋白DPP-IV抑制肽的稳定性
        2.3.1 热稳定性(见图6)
        2.3.2 pH稳定性(见图7)
        2.3.3 体外模拟胃肠道消化稳定性(见图8)
3 结 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]大豆肽钙螯合物的制备、稳定性及表征[J]. 王俊强,孔祥珍,华欲飞.  中国油脂. 2019(10)
[2]核桃肽生物活性的研究进展[J]. 珠娜,李勇.  中国食物与营养. 2018(12)



本文编号：3713246