哈密大枣中β-D-葡萄糖苷酶活性测定条件的优化

发布时间：2024-04-15 04:11

　　该试验旨在对哈密大枣中β-D-葡萄糖苷酶活性测定条件进行研究。通过Box-Behnken响应面优化β-D-葡萄糖苷酶活性的测定条件,并对哈密大枣在不同干制过程中β-D-葡萄糖苷酶活性的变化进行测定。结果表明:当酶解时缓冲溶液的p H为5.3, PVP添加量为3%,酶解温度为36℃,酶解时间为94 min,测定波长为400 nm时,酶活性最大,该条件适于哈密大枣中β-D-葡萄糖苷酶活性的测定。在确定测定条件的基础上,对哈密大枣在不同干制方式及过程中的β-D-葡萄糖苷酶活性变化规律进行了研究。结果表明,在自然晒干条件下,β-D-葡萄糖苷酶活性在干制第2天上升到最高点(1 700.32 U),在第6天酶活性消失;在45℃热风干制过程中,β-D-葡萄糖苷酶在第8小时活性到达最高点(3 692.13 U),在第36小时酶活性消失。

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【部分图文】：

图1对硝基苯酚波长扫描

由图1可知，对硝基苯酚在390～420nm可见光波长范围内有特征吸收曲线，且在400nm处有最大吸收峰，因此确定400nm是对硝基苯酚的最适测定波长。2.1.2对硝基苯酚标准曲线

图2对硝基苯酚标准曲线

由图2可知，标准曲线为y=0.0172x+0.0074，相关系数R2=0.9991，对硝基苯酚与吸光度线性关系良好，符合测定要求。2.1.3PVP添加量对酶活性的影响

图3PVP添加量对酶活性的影响

在2.1.3和2.1.4试验基础上，对反应过程中缓冲溶液的类型与pH进行筛选。由图5可知，乙酸-乙酸钠在pH5.5时的酶活性明显高于其他类型的缓冲溶液，柠檬酸-柠檬酸三钠与柠檬酸-磷酸二钠的酶活性较低。由此得出，选用乙酸-乙酸钠在pH5.5时对哈密大枣中β-D-葡萄糖苷....

图4不同温度、时间对酶活性的影响

图3PVP添加量对酶活性的影响图5不同缓冲液类型和pH对酶活性的影响曲线

本文编号：3955717