基于微滴数字聚合酶链式反应定量检测木薯源成分

发布时间：2025-03-20 01:23

　　 根据木薯单拷贝木薯铜/锌超氧化物歧化酶(Manihotesculenta copper/zinc superoxide dismutase,mSOD2)基因序列设计特异性引物和探针,建立木薯成分微滴数字PCR定量检测方法,并测试了方法的特异性、灵敏度和适应性,并建立了拷贝数浓度(copies/μL)与木薯质量(mg)的线性关系。特异性测试表明,该方法特异于木薯成分检测,定量下限(limit of quantitation,LOQ)和检测下限(limit of detection,LOD)分别为1.67 copies/μL和0.28 copies/μL。对木薯质量百分比为5%和25%样本进行定量检测,检测结果经线性关系换算得到的木薯含量分别为5.77%和23.32%,回收率分别为115.40%和93.26%,相对标准偏差(RSD)为3.53%～4.19%。表明该方法具有良好的适用性,可对质量百分比为5%及以上木薯含量的样品进行准确定量。

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【部分图文】：

图1 木薯质量与拷贝数浓度线性关系

表3木薯质量与mSOD2基因拷贝数浓度测试质量/mg拷贝数浓度/(copies/μL)平均值/(copies/μL)SD相对标准偏差/RSD1235.0081.8081.3081.2081.430.320.39%15.00244.0021....

图5 适应性测试热点图

图4LOQ验证3结论

图2 木薯质量(mg)与拷贝数浓度(copies/μL)测试热点图

图1木薯质量与拷贝数浓度线性关系2.3LOD和LOQ测定及验证

图3 LOD和LOQ测试热点图

表4LOD和LOQ测试结果DNA浓度/(ng/μL)拷贝数浓度/(copies/μL)平均值/(copies/μL)SD相对标准偏差/RSD12318.00101.5097.8095.0098.103.263.32%3.6017.3017....

本文编号：4037159