一种新型Cry1Bd蛋白及其原核表达

发布时间：2021-11-20 04:19

　　Cry1B对鳞翅目和鞘翅目昆虫具有特异的杀虫活性,但是目前对其研究相对较少。不断发掘新的Cry1B蛋白并研究其杀虫机制能够为农业害虫的生物防治提供依据。前期鉴定出一种新的cry1Bd基因,将其命名为newcry1Bd。首先,将new-Cry1Bd蛋白与其他Cry1B家族蛋白进行亲缘关系对比,确定其所属分支,然后,把该基因克隆至pHT304载体,由cry1Ac基因启动子和终止子调控其在Bt菌株中的表达;另外,为了研究new-Cry1Bd蛋白N端杀虫活性区域的表达稳定性,把其N端编码序列单独克隆至pHT304中,构建类似的表达框架,用于蛋白表达分析。结果发现,new-Cry1Bd蛋白与Cry1Bd分支最为接近;序列比对结果显示,new-Cry1Bd蛋白与Cry1Bd1蛋白仅相差3个氨基酸（S572、E1147和L1227）,其中,只有第一个差异位点位于N端活性区域,该蛋白及其N端部分（new-Cry1Bdhalf）均能在Bt菌株中表达,但其表达产物的可溶性差异较大,约有1/2的new-Cry1Bd蛋白表达产物可以溶解于Na₂CO₃溶液,而大部分n... 

【文章来源】：山西农业科学. 2020,48(05)

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 氨基酸多序列比对构建进化树
        1.2.2 表达载体的构建
        1.2.3 2种蛋白的表达与可溶性分析
2 结果与分析
    2.1 new-Cry1Bd蛋白亲缘关系分析
    2.2 载体的构建及鉴定
    2.3 2个蛋白的表达和可溶性分析
3 结论与讨论



本文编号：3506551