四环素与苯并a芘复合污染对tetA（C）基因产生高抗性突变的影响

发布时间：2024-02-23 21:42

　　近年来,环境中抗生素浓度不断提高,微生物对抗生素的抗性也在不断增强。目前有大量研究表明抗生素抗性基因(Antibiotic Resistance Genes,ARGs)丰度异常增加会导致微生物产生高抗性,然而一些研究也表明ARGs突变也能导致微生物产生高抗性。环境中存在各种各样的致基因突变物质,例如多环芳烃(Polycyclic Aromatic Hydrocarbon,PAHs),而PAHs中尤以苯并a芘(Bap)致突变效果突出。为了探究环境中致突变物质与抗生素复合污染对ARGs的影响,本试验选取了具有致突变效应的Bap和常见抗生素四环素TC作为污染物质,以及四环素抗性基因tetA(C)作为研究对象。本试验首先建立了 tetA(C)突变基因文库,并从中筛选出高抗性tetA(C)突变株,再通过测序建立tetA(C)基因突变位点-高抗关系密码表。然后设置不同浓度Bap与TC处理组,培养供试菌株14d,结合密码表分析Bap与TC复合污染与高抗性基因突变株出现概率之间的关系。最后采取真实环境中的土壤样本,分析当前Bap、TC污染情况以及四环素抗性基因突变情况,并分析三者之间可能存在的关系。本...

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１?ＴＣ在环境中的迁移途径??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ??

度的抗生素污染（章强ｅｔ?ａｌ．，２０１４），其中污水处理厂和养殖场附近的废水中抗生??素污染最为严重（Ｂｏｘａｌｌ?ｅｔ?ａｌ．，?２００５），另外在被检测水体中ＴＣ是检出率最高且浓度最??高的抗生素（Ｃｈｅｎ?ｅｔａｌ．，?２０１４）。??饲料（伴冇抗生素）??ｊｊ?＇［动物....

图１－２四环素外排泵的拓扑结构??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｏｐｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ?ｅｆｆｌｕｘ?ｐｕｍｐ??

著增加，其中也包括ＡＲＧｓ突变，而??ＡＲＧｓ突变频繁发生会使得微生物产生高抗性的概率也相应增加。一旦微生物通过??ＡＲＧｓ突变获得了高抗性，则当环境中存在亚治疗剂量抗生素时，相当于增加了微生??物的抗性选择压力，高抗性ＡＲＧｓ突变株相较于其他菌株更易于保存下来，并逐渐在??环境....

图２－２高保真ＰＣＲ扩增ｔｅｔＡ（Ｃ）基因产物凝胶电泳图像??Ｆｉｇ．?２－２?Ｇｅｌ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ｈｉｇｈ?ｆｉｄｅｌｉｔｙ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｅｔＡ（Ｃ）?ｇｅｎｅ??

?四环素与苯并ａ芘复合污染对ｔａｔＡ（Ｃ）基因产生高抗性突变的影响???证该质粒己导入供试菌株体内，图２－１为凝胶电泳检测ｔｅｔＡ（Ｃ）基因的结果，１／２条带??均显示为阳性。为进一步验证该菌株已构建成功，对１／２条带的ｔｅｔＡ（Ｃ）基因片段进行??测序，结果显示该基因与标准ｔｅ....

图２－１常规ＰＣＲ扩増ｔｅｔＡ（Ｃ）基因凝胶电泳图像??Ｆｉｇ．?２－１?Ｇｅｌ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ｇｅｎｅｒａｌ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｅｔＡ（Ｃ）?ｇｅｎｅ??

?四环素与苯并ａ芘复合污染对ｔａｔＡ（Ｃ）基因产生高抗性突变的影响???证该质粒己导入供试菌株体内，图２－１为凝胶电泳检测ｔｅｔＡ（Ｃ）基因的结果，１／２条带??均显示为阳性。为进一步验证该菌株已构建成功，对１／２条带的ｔｅｔＡ（Ｃ）基因片段进行??测序，结果显示该基因与标准ｔｅ....

本文编号：3908023