水体中LXRα活性筛查及其效应物质的高通量鉴定

发布时间：2024-02-23 22:05

　　内分泌干扰物质是一类可能干扰体内激素作用的外源性化学物质,这类物质主要作为核受体的配体干扰细胞的转录过程,影响人体的内分泌功能,破坏内分泌系统功能,对人体健康产生负面影响。大量的研究表明环境中普遍存在内分泌干扰物质,天然水体、土壤、沉积物乃至室内灰尘中都检测到破坏内分泌的化学物质。肝X受体(LXRs)是核受体家族的成员,是细胞和机体内的胆固醇敏感元件。LXRs可以通过调节泡沫细胞的形成和体内炎症因子的水平从而阻止动脉粥样硬化疾病的发生和发展。由于越来越多的化学物质进入到环境中,导致环境介质中存在着大量潜在的且具有LXRs活性效应的污染物质,然而对于导致此类活性的LXRs效应物质的具体身份却难以确定。传统的未知物质鉴定技术因其化学分析与生物活性测试相对独立,选择性低、工作量大以及鉴定效果差等缺点,难以满足复杂环境基质中痕量活性物质的鉴定,因此迫切需要革新现有鉴定环境基质中复杂污染物质的方法。本研究基于核受体蛋白与小分子亲和结合的原理,拟采用LXRs蛋白特异性地捕捉物质,联合非靶向分析和高通量鉴定的方法,寻找环境介质中潜在的LXRs效应物质。主要研究成果如下:(1)本研究以LXRα为例,首...

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图1.1总技术路线图

重庆大学硕士学位论文16图1.1总技术路线图Fig.1.1TechnologyRoadmap

图2.1LXRα受体蛋白与物质结合的实验流程图

2具有LXRα活性效应物质的新型筛查方法研究23图2.1LXRα受体蛋白与物质结合的实验流程图Fig.2.1ExperimentalflowchartofLXRαreceptorproteinandsubstancebinding2.2.9仪器分析的条件UHPLC条件:ACQUI....

图2.2pCold-TF-LXRα蛋白表达条件优化SDS-PAGE图(A、B分别代表不同温度和不同IPTG浓度对蛋白表达的影响)

重庆大学硕士学位论文26图2.2pCold-TF-LXRα蛋白表达条件优化SDS-PAGE图(A、B分别代表不同温度和不同IPTG浓度对蛋白表达的影响)Fig.2.2SDS-PAGEforOptimizationofpCold-TF-LXRαproteinexpressionco....

图2.3BSA蛋白标准曲线

2具有LXRα活性效应物质的新型筛查方法研究27图2.3BSA蛋白标准曲线Fig.2.3BSAproteinstandardcurvepCold-TF-LXRα和pCold-TF空载体测定的纵坐标分别为4.745和5.141，通过回归方程可计算得浓度分别为9.405和10.442....

本文编号：3908050