苎麻重金属转运P型ATP酶基因HMA1的克隆与功能分析

发布时间：2024-12-11 03:34

　　植物重金属ATP酶(heavy metal transporting ATPase,HMA)涉及植物对重金属的吸收、转运、解毒和富集等方面。为探究重金属ATP酶HMA在苎麻耐镉机制中的作用机制,本研究采用同源克隆法获得了苎麻Bn HMA1,并对其进行了生物信息学分析及表达分析;构建了苎麻酵母cDNA文库,成功构建了p GBKT7-Bn HMA1融合载体和p426GPD-Bn HMA1酵母表达载体,分析了转Bn HMA1酵母耐Cd表型,为后续研究镉胁迫下Bn HMA1的分子机理奠定了基础,主要研究结果如下:(1)根据苎麻转录组测序结果中HMA基因的保守序列设计特异性引物,采用RACE(rapid-amplification of cDNA ends)技术从苎麻中获得了HMA全长cDNA序列(Genbank:MK733841.1)。该基因cDNA全长为2 811 bp,含有一个2 487 bp的开放阅读框,编码蛋白含828个氨基酸残基,分子量为90.70 k Da,等电点(p I)为8.84,属于P-type ATPase家族成员。与川桑(Morus notabilis)、白梨(Pyrus ...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1土壤中Cd的修复措施（引自文献8）

第1章绪论3图1-1土壤中Cd的修复措施（引自文献8）Fig.1-1RemediationtechnologiesusedforsoilcontaminatedwithCd1.2植物耐镉分子机制研究进展通过不断进化与自然选择，植物发展出了抵御重金属毒害的防御机制，一方面通过调控根....

图1-3构建Mate&Plate酵母文库原理

第1章绪论7个目的向量，许多研究者使用Gateway技术、-Fusion技术等[48]。而且，在最近的研究中，两个cDNA文库分别用作诱饵文库和猎物文库，随后进行交配和筛选，从而可以在一个库中筛选多个文库[49]。构造方法的不断改进使文库中包含的信息更加全面和完整。Clontec....

图2-1PCR扩增电泳图

第2章苎麻重金属ATP酶BnHMA1的克隆与序列分析17图2-1PCR扩增电泳图Fig.2-1PCRamplificationelectrophoresisDNAmarker上样量为5μl，样品上样量为10μl；A：3"RACE的PCR扩增电泳图；B：5"RACE的PCR扩增电泳....

图2-2BnHMA1蛋白理化性质预测分析

湖南农业大学硕士学位论文

本文编号：4016121