矮牵牛PhLcyB基因的克隆及功能分析
发布时间：2021-08-01 06:46
本研究以矮牵牛为实验材料,利用VIGS技术验证矮牵牛类胡萝卜素代谢途径关键酶基因PhLcyB的功能,为探究植物叶片中类胡萝卜素的代谢调控的分子机制及类胡萝卜素在叶片呈色方面的作用机理提供理论依据。本实验克隆获得了PhLcyB基因的完整ORF序列,通过VIGS技术构建了TRV-PhLcyB和TRV-PhCHS重组载体,通过侵染发现TRV-PhLcyB侵染的的矮牵牛植株叶片出现大面积白化现象,花瓣颜色没有明显变化。进行叶片生化检测后,发现PhLcyB基因沉默后叶片中类胡萝卜素含量明显降低,尤其是叶黄素降低明显,同时叶片中叶绿素a和叶绿素b含量明显降低。PhLcyB基因对矮牵牛叶片中类胡萝卜素（尤其是叶黄素）的代谢调节有重要作用。
【文章来源】：基因组学与应用生物学. 2020,39(11)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
携带Ph Lcy B,Ph CHS基因片段的重组载体验证注:M:DL1000 DNA Marker
图4 携带Ph Lcy B,Ph CHS基因片段的重组载体验证注:M:DL1000 DNA Marker1.5 矮牵牛Ph Lcy B基因的定量表达分析
以TRV-Ph Lcy B组，TRV空载体组和Mock control组花期矮牵牛的叶片为实验材料，提取RNA进行表达量检测分析。TRV-Ph Lcy B植株，TRV空载体对照植株均检测出TRV1载体，表明农杆菌侵染成功，并且Mock control组中没有检测到TRV载体；TRV-Ph Lcy B组中Ph Lcy B基因表达量明显低于TRV空载体组和Mock control组中Ph Lcy B基因表达量，出现了基因沉默现象(图7)。q RT-PCR分析结果显示，TRV-Ph Lcy B组中Ph Lcy B基因表达量明显低于TRV空载体组和Mock control组中Ph Lcy B基因表达量。而TRV空载体组和Mock control组中Ph Lcy B基因表达量相比并未出现明显变化(图8)。2 讨论
【参考文献】：
期刊论文
[1]芹菜中类胡萝卜素合成相关番茄红素ε–环化酶基因AgLCYE的克隆与表达分析[J]. 李静文,马静,却枫,王枫,徐志胜,熊爱生. 园艺学报. 2018(02)
[2]VIGS实验技术体系在月季中的应用及优化[J]. 丁榕,梁晶,赵和文,张克中,崔金腾. 中国农学通报. 2018(03)
[3]万寿菊番茄红素β-环化酶基因及其启动子克隆和功能分析[J]. 张春玲,王尼慧,王宁乐,包满珠,何燕红. 中国农业科学. 2017(24)
[4]黄秋葵番茄红素β-环化酶LCYB基因的克隆与分析[J]. 李永平,陈敏氡,朱海生,温庆放,刘建汀. 植物遗传资源学报. 2018(01)
[5]欧李番茄红素β–环化酶基因ChLCYb的分离与功能鉴定[J]. 张建成,高利敏,王鹏飞,杨淑一,郑斌,王裕添,杜俊杰. 园艺学报. 2017(11)
[6]类胡萝卜素代谢调控与植物颜色变异[J]. 陆晨飞,刘钰婷. 北方园艺. 2016(16)
[7]百合花色机理研究进展[J]. 孔滢,窦晓莹,包放,郎利新,白锦荣. 园艺学报. 2015(09)
[8]8种中国野生百合花色素成分分析[J]. 郭鸿飞,张延龙,牛立新,罗建让. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2015(03)
[9]深色叶植物叶片类胡萝卜素含量比较[J]. 黄秋婵,许元明,韦友欢,梁云贞. 湖北农业科学. 2013(11)
[10]Virus-induced gene silencing and its application in plant functional genomics[J]. HUANG ChangJun, QIAN YaJuan, LI ZhengHe & ZHOU XuePing* State Key Laboratory of Rice Biology, Institute of Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China. Science China（Life Sciences）. 2012(02)
博士论文
[1]矮牵牛转录因子PhOBF1和PhERF2影响病毒诱导基因沉默效率的机理研究[D]. 孙道阳.西北农林科技大学 2016
硕士论文
[1]矮牵牛PhCESA3基因功能鉴定[D]. 杨伟苑.华南农业大学 2016
[2]百合查尔酮合成酶（CHS）基因对花色调控影响的研究[D]. 化占勇.西北农林科技大学 2010
本文编号：3315028
【文章来源】：基因组学与应用生物学. 2020,39(11)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
携带Ph Lcy B,Ph CHS基因片段的重组载体验证注:M:DL1000 DNA Marker
图4 携带Ph Lcy B,Ph CHS基因片段的重组载体验证注:M:DL1000 DNA Marker1.5 矮牵牛Ph Lcy B基因的定量表达分析
以TRV-Ph Lcy B组，TRV空载体组和Mock control组花期矮牵牛的叶片为实验材料，提取RNA进行表达量检测分析。TRV-Ph Lcy B植株，TRV空载体对照植株均检测出TRV1载体，表明农杆菌侵染成功，并且Mock control组中没有检测到TRV载体；TRV-Ph Lcy B组中Ph Lcy B基因表达量明显低于TRV空载体组和Mock control组中Ph Lcy B基因表达量，出现了基因沉默现象(图7)。q RT-PCR分析结果显示，TRV-Ph Lcy B组中Ph Lcy B基因表达量明显低于TRV空载体组和Mock control组中Ph Lcy B基因表达量。而TRV空载体组和Mock control组中Ph Lcy B基因表达量相比并未出现明显变化(图8)。2 讨论
【参考文献】：
期刊论文
[1]芹菜中类胡萝卜素合成相关番茄红素ε–环化酶基因AgLCYE的克隆与表达分析[J]. 李静文,马静,却枫,王枫,徐志胜,熊爱生. 园艺学报. 2018(02)
[2]VIGS实验技术体系在月季中的应用及优化[J]. 丁榕,梁晶,赵和文,张克中,崔金腾. 中国农学通报. 2018(03)
[3]万寿菊番茄红素β-环化酶基因及其启动子克隆和功能分析[J]. 张春玲,王尼慧,王宁乐,包满珠,何燕红. 中国农业科学. 2017(24)
[4]黄秋葵番茄红素β-环化酶LCYB基因的克隆与分析[J]. 李永平,陈敏氡,朱海生,温庆放,刘建汀. 植物遗传资源学报. 2018(01)
[5]欧李番茄红素β–环化酶基因ChLCYb的分离与功能鉴定[J]. 张建成,高利敏,王鹏飞,杨淑一,郑斌,王裕添,杜俊杰. 园艺学报. 2017(11)
[6]类胡萝卜素代谢调控与植物颜色变异[J]. 陆晨飞,刘钰婷. 北方园艺. 2016(16)
[7]百合花色机理研究进展[J]. 孔滢,窦晓莹,包放,郎利新,白锦荣. 园艺学报. 2015(09)
[8]8种中国野生百合花色素成分分析[J]. 郭鸿飞,张延龙,牛立新,罗建让. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2015(03)
[9]深色叶植物叶片类胡萝卜素含量比较[J]. 黄秋婵,许元明,韦友欢,梁云贞. 湖北农业科学. 2013(11)
[10]Virus-induced gene silencing and its application in plant functional genomics[J]. HUANG ChangJun, QIAN YaJuan, LI ZhengHe & ZHOU XuePing* State Key Laboratory of Rice Biology, Institute of Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China. Science China（Life Sciences）. 2012(02)
博士论文
[1]矮牵牛转录因子PhOBF1和PhERF2影响病毒诱导基因沉默效率的机理研究[D]. 孙道阳.西北农林科技大学 2016
硕士论文
[1]矮牵牛PhCESA3基因功能鉴定[D]. 杨伟苑.华南农业大学 2016
[2]百合查尔酮合成酶（CHS）基因对花色调控影响的研究[D]. 化占勇.西北农林科技大学 2010
本文编号：3315028
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