体外扩增的Vγ9Vδ2T细胞抗H1N1流感病毒效应的研究

发布时间：2017-10-13 04:19

  本文关键词：体外扩增的Vγ9Vδ2T细胞抗H1N1流感病毒效应的研究

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【摘要】：目的探讨帕米磷酸钠(PAM)体外扩增培养的人外周血Vγ9Vδ2 T细胞对感染流感病毒H1N1的人肺上皮细胞A549的细胞毒效应。方法 PAM和IL-2联合刺激培养健康成人外周血单个核细胞(PBMC)10~14 d,免疫磁珠分选法纯化得到Vγ9Vδ2 T细胞,再将Vγ9Vδ2 T细胞与感染流感病毒的A549细胞按不同的效靶比(E∶T)接触共育或按E∶T=20∶1非接触共育6 h。流式细胞分析术检测A549的存活率及Vγ9Vδ2 T细胞穿孔素(perforin)的表达情况,收集培养上清检测流感病毒的滴度,提取培养上清及A549细胞的总RNA,实时荧光定量检测流感病毒基质蛋白M1基因的表达情况。结果 PAM在体外能有效活化并扩增Vγ9Vδ2 T细胞。Vγ9Vδ2 T细胞对感染流感病毒的A549细胞具有较强的杀伤作用,且随E∶T的升高而增大,在E∶T=20∶1时,Vγ9Vδ2 T细胞能杀伤60%的感染了流感病毒的A549细胞。接触共育组的A549细胞杀伤率明显高于非接触共育组(P0.05)。Vγ9Vδ2 T细胞经流感病毒感染后Perforin的表达明显上调。接触共育组的病毒复制也明显受到抑制(P0.05)。结论 PAM刺激扩增的Vγ9Vδ2 T细胞能有效杀伤感染流感病毒的人肺上皮细胞A549,其效应机制依赖于两者细胞间的接触。
【作者单位】： 四川大学华西第二医院出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室;成都市血液中心;四川大学华西第二医院儿科;
【关键词】： VγVδT细胞 帕米磷酸钠 流感病毒 A细胞
【基金】：国家自然科学基金(81471848)
【分类号】：R373.13
【正文快照】： (陶于洪);610041,成都市血液中心(巩天祥)γδT细胞是人固有免疫系统的重要组成部分,表达有限的多样性TCR受体[1]。同时γδT细胞又具有免疫记忆及适应性免疫的特点。非MHC限制性的识别模式让其参与了机体免疫应答的早期反应,因此,γδT细胞被视为免疫防御和免疫监视的第1道重

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