单个人造血干细胞体外培养体系用于小分子化合物筛选

发布时间：2017-10-16 19:20

  本文关键词：单个人造血干细胞体外培养体系用于小分子化合物筛选

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【摘要】：目的:探索一种高效且稳定验证小分子化合物对人造血干细胞(hHSC)调控作用的体系和方法。方法:用流式细胞术结合目前对h HSC表面标记的研究,优化h HSC分选过程,将干细胞培养精确至单个细胞水平,进而研究小分子化合物对细胞干性的影响。用已发表的对人HSC有扩增作用的小分子化合物SR1及UM171处理单个h HSC,14 d后进行细胞表型流式细胞术检测以及细胞涂片观察形态,同时利用CFC和CAFC验证培养后细胞造血功能的变化。结果:多细胞培养中2种小分子化合物及其组合作用与已知研究相符,并由此获得化合物使用浓度。多参数单细胞分选(CD34+CD38-CD45RA-CD90+CD49f+)及体外培养结果与多细胞培养结果一致,细胞形态分析结果与流式细胞术检测结果一致。此外,CFC和CAFC体外造血功能实验中,处理组细胞集落形成能力显著高于对照组(P0.05)。结论:建立了一个周期短且扩增作用稳定的单个hHSC体外培养体系和验证小分子化合物作用的方法,为小分子化合物筛选建立了可靠的平台并为以后的h HSC扩增研究打下基础。
【作者单位】： 中国医学科学院 北京协和医学院血液病医院 血液学研究所 实验血液学国家重点实验室;中国医学科学院 北京协和医学院血液病医院口腔科;
【关键词】： 单细胞 造血干细胞 小分子 化合物筛选
【分类号】：R329.2
【正文快照】： J Exp Hematol 2016;(3):845-851造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)具有自我更新和多向分化的潜能,在保持干细胞池相对稳定的同时又可增殖分化成造血系统中各系细胞[1]。由于血细胞群体的高度异质性以及HSC的稀少为HSC的研究增加了巨大的困难,因此HSC维持长期自我更新

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