结核分枝杆菌Esx-1底物蛋白Rv3615c的原核表达及其免疫功能研究

发布时间：2017-10-20 22:36

  本文关键词：结核分枝杆菌Esx-1底物蛋白Rv3615c的原核表达及其免疫功能研究

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【摘要】：目的:构建结核分枝杆菌(M.tb)Esx-1底物蛋白Rv3615c的原核表达质粒p ET30b-Rv3615c并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达;以全血IFN-γ分析试验(WBIA)检测rRv3615c蛋白能否被淮南市M.tb感染者T细胞所识别;在小鼠模型中检测其免疫原性。方法:以分子克隆技术构建重组载体p ET30b-Rv3615c并表达、纯化rRv3615c蛋白,以WBIA检测rRv3615c抗原刺激淮南市M.tb感染者和未感染者外周血淋巴细胞产生的特异性IFN-γ水平。此外联合佐剂SAS免疫C57BL/6小鼠,评价其体液免疫应答和Th1型应答水平。结果:成功构建p ET30b-Rv3615c质粒,SDS-PAGE和Western blot显示其正确表达和纯化。rRv3615c蛋白特异性刺激淮南市M.tb感染者淋巴细胞产生的IFN-γ浓度显著高于健康对照者。Rv3615c/SAS诱导小鼠产生的IgG、IgG1、IgG2a以及Rv3615c1SAS诱导小鼠脾淋巴细胞分泌的特异性IFN-γ、TNF-α和IL-2,均显著高于PBS组和SAS组,显示rRv3615c可诱导趋向于Th1型免疫应答。结论:Rv3615c可被淮南市M.tb感染者T细胞识别,具有较强的免疫原性,是用于结核病(TB)预防和诊断的潜力靶抗原。
【作者单位】： 安徽理工大学医学院病原生物学与免疫学教研室;
【关键词】： Rvc 原核表达 免疫功能 全血IFN-γ分析试验 结核分枝杆菌
【分类号】：R378.91+1
【正文快照】： 卡介苗(Bacille calmette-Guerin,BCG)作为当前全球范围内唯一广泛应用于结核病(Tuberculosis,TB)预防的减毒活疫苗,尽管对婴幼儿TB(尤其是结核性脑膜炎和粟粒性TB)预防效果较好,但却受制于免疫保护期较短、对成人TB保护性不够理想的缺陷[1,2]。因此,筛选具有高度免疫原性的、

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本文编号：1069794