小鼠生精细胞的体外双室无血清培养

发布时间：2017-10-26 01:15

  本文关键词：小鼠生精细胞的体外双室无血清培养

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【摘要】：目的探讨无血清条件下应用插入式细胞培养皿(Transwell小室)对小鼠睾丸间质细胞-支持细胞-生精细胞的双室培养技术。方法取60日龄C57BL/6雄性小鼠睾丸间质细胞和15日龄雄性小鼠睾丸支持细胞与生精细胞混合细胞团双室共培养,不添加血清。每日在倒置显微镜下观察生精细胞的形态和生长情况,苏木精染色观察生精细胞形态,染色体倍性分析检测细胞分化情况。结果在培养1周后,可见圆形精子细胞出现,2周后可见长形精子细胞,3周后可见较短鞭毛,生精细胞可存活8周;培养1周时,流式细胞术可检测出单倍体细胞,单倍体细胞百分比随培养时间延长而增加。结论应用双室无血清培养体系体外培养小鼠生精细胞可获得精子且生精细胞存活时间较长。
【作者单位】： 河北医科大学基础医学院组织胚胎学教研室;河北医科大学第一医院肾内科;
【关键词】： 精细胞 细胞培养技术 小鼠
【基金】：河北省自然科学基金项目(H2013201139)
【分类号】：R321.1
【正文快照】： 由于精子发生与睾丸结构的复杂性,很难针对整个有机体精子发生及相关基因的作用机制进行深入研究。同时,外源化学物质对精子发生的影响逐渐引起更多学者的关注,主要以动物实验和体外研究为主[1-2]。因此,生精细胞的体外培养成为深入研究精子发生过程,阐明精子发生相关基因功能

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本文编号：1096350