两株小鼠诺如病毒的分离与鉴定

发布时间：2017-10-26 21:44

  本文关键词：两株小鼠诺如病毒的分离与鉴定

  更多相关文章： 诺如病毒 小鼠 病毒分离 鉴定

【摘要】：目的了解江苏地区常用实验小鼠诺如病毒(murine norovirus,MNV)的感染情况及进化特征。方法在江苏地区抽取三个实验动物中心的实验小鼠,采集直肠及内容物样本,应用RT-PCR方法检测MNV ORF2特异性基因(547bp,MNV nt5104-5650)。阳性样本经RAW264.7细胞分离病毒,对MNV分离株的VP1基因进行扩增,将其连接在p EASY-Blunt载体上,转化至大肠杆菌Trans1-T1感受态细胞,通过Kanamycin抗性筛选,挑取菌落进行PCR鉴定,鉴定为阳性的克隆送检测定其VP1基因序列,构建系统发生进化树。结果共检测小鼠直肠内容物30份,检出MNV阳性样本4份,包括ICR小鼠(2/8)、BALB/c小鼠(1/12)和C57BL/6J小鼠(1/10),感染率为13.3%;RAW264.7细胞接毒盲传三代,两只ICR小鼠样品接种的细胞产生明显细胞病变(CPE),表现为细胞圆缩聚集,大部分脱落死亡,而C57BL/6J和BALB/c小鼠样本接种RAW264.7细胞无CPE;应用VP1特异引物经RT-PCR检测,表现CPE的细胞样本出现特异条带,测序结果显示分离到的2株MNVVP1核酸序列均为1626bp,与引物设计参考毒株S7-P2(Gen Bank登录号:AB435514)VP1基因大小相同,进化树图表显示检测到的2株MNV属同一独立小分支与参考株BJ10-2062、CR4最为相近。结论此次抽检的实验小鼠MNV感染率为13.3%(4/30),考虑可能在同一设施内传播。常用实验小鼠携带病毒的生物学意义有待进一步研究。
【作者单位】： 南京军区南京总医院比较医学科全军实验动物科普与伦理教育基地全国科普教育基地;
【关键词】： 诺如病毒 小鼠 病毒分离 鉴定
【基金】：中国人民解放军南京军区南京总医院科学研究课题(No.2015061)
【分类号】：R373
【正文快照】： 诺如病毒(noroviruses,No Vs)属嵌杯状病毒科,直径27—35 nm,病毒无囊膜[1]。No Vs是导致非细菌性急性胃肠炎的主要病原体,在全球范围内超过90%的非细菌性胃肠炎疾病的病例都是由该病毒引起[2]。除了人以外,No Vs还存在于猪、牛和实验小鼠中。No Vs基因组为单股正链RNA,长度约

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 田春梅;李洁;吴安华;;诺如病毒——挑战感染控制[J];中国感染控制杂志;2008年05期

2 郭丽;王健伟;洪涛;;诺如病毒分子生物学研究进展[J];传染病信息;2009年03期

3 南海;沈权;华修国;崔立;;诺如病毒研究进展[J];上海畜牧兽医通讯;2010年05期

4 寇晓霞;吴清平;薛亮;;水源性诺如病毒[J];微生物学通报;2012年04期

5 杨桂华;陈露露;王晓磊;李善爽;赵凌侠;;大肠杆菌表达诺如病毒P粒子生物活性及其超微形态[J];中国生物工程杂志;2013年03期

6 李红梅;;诺如病毒研究进展[J];华夏医学;2013年04期

7 寇晓霞;吴清平;薛亮;张菊梅;;贝类中诺如病毒的研究进展[J];中国食品卫生杂志;2014年02期

8 吴清平;姚琳;张菊梅;王大鹏;寇晓霞;;诺如病毒结构蛋白的研究进展[J];病毒学报;2008年04期

9 纪蕾;吴晓芳;徐德顺;龚黎明;;湖州市非细菌性急性胃肠炎暴发中诺如病毒的分子生物学特点初步研究[J];病毒学报;2011年05期

10 吴微;张宏斌;张海龙;杨洪;陈惠玲;舒柏华;何雅青;;2010年深圳地区诺如病毒的基因分型[J];病毒学报;2012年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 钟文龙;傅深省;王莉;陈湘雷;朱建忠;陈茂余;杨玉芳;;一起老年精神病区诺如病毒感染暴发的调查[A];2011广东省预防医学会学术年会资料汇编[C];2011年

2 张巧利;钟新光;曾耀明;夏宪照;王晓霞;陈柏芬;;一起社区诺如病毒腹泻爆发调查分析[A];第八届粤港澳台预防医学学术交流会议论文汇编[C];2008年

3 曾玫;陈洁;龚四堂;徐晓华;朱朝敏;朱启昒;;我国五所城市门诊腹泻儿童诺如病毒感染的临床和分子流行病学监测[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编（上册）[C];2010年

4 薛亮;吴清平;;诺如病毒分子进化研究进展[A];2010第二届中国食品安全高峰论坛论文集[C];2010年

5 邹勇;;某中学1起诺如病毒腹泻暴发疫情的现场调查分析[A];浙江省第十九届农村卫生改革与发展学术会议大会论文集[C];2011年

6 丁华;;一起涉及7所学校的Ⅰ型诺如病毒感染性腹泻暴发调查[A];中华医学会第一届全国公共卫生学术会议暨第四届中国现场流行病学培训项目汇编[C];2009年

7 吕虹;张国军;康熙雄;;应用恒温扩增方法进行诺如病毒检测的研究[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年

8 夏体娇;陈照立;谌志强;邱志刚;王景峰;金敏;王新为;李君文;;2009年秋冬季节天津市病毒性腹泻诺如病毒检出情况分析[A];2011年全国环境卫生学术年会论文集[C];2011年

9 马丽萍;姚琳;苏来金;赵峰;周德庆;;牡蛎中诺如病毒几种不同富集方法的比较[A];中国食品科学技术学会第七届年会论文摘要集[C];2010年

10 李丹;唐庆娟;李兆杰;王玉明;薛勇;薛长湖;;三种分子生物学方法检测牡蛎中诺如病毒的比较研究[A];2008年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2008年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 保健时报记者 穆晶晶;感染诺如病毒别惊慌[N];保健时报;2007年

2 本报记者 刘远芬;诺如病毒仍有爆发风险[N];医药经济报;2007年

3 中国疾控中心病毒所腹泻病研究室主任 段招军;诺如病毒感染 并非防不胜防[N];健康报;2010年

4 首都医科大学附属北京佑安医院急诊科主任 李俊红 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所研究员 张见麟;勤洗手 远离诺如病毒[N];健康报;2012年

5 本报记者 金振娅;面对诺如病毒不必恐慌[N];光明日报;2012年

6 钱峰;严防诺如病毒疫情传入和扩散[N];健康报;2007年

7 郑灵巧　白莹;北京 诺如病毒发病危险上升[N];健康报;2007年

8 周欣;诺如病毒感染是可以预防的[N];中国医药报;2007年

9 张爱强　记者　 夏丹;阻击诺如病毒入侵[N];烟台日报;2007年

10 本报记者 王朝;生吃贝类当心诺如病毒[N];保健时报;2008年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 赛林涛;济南成人诺如病毒感染及儿童轮状与诺如病毒感染特征比较的研究[D];山东大学;2014年

2 司红丽;诺如病毒核酸荧光定量检测及其衣壳蛋白基因重组腺病毒免疫效果的研究[D];西北农林科技大学;2006年

3 孙秀静;1.分泌型和非分泌型母亲母乳中诺如病毒抗体水平的研究 2.238例极低出生体重早产儿的生长速率和影响因素[D];中国协和医科大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 田毅;GⅡ-4型诺如病毒P粒子制备及HBGAs相关性研究[D];华北理工大学;2015年

2 杨桂华;用番茄（Solanum lycopersicum）表达口服Norovirus亚单位疫苗[D];上海交通大学;2013年

3 钱明明;诺如病毒RT-PCR方法的建立及其江苏部分地区的流行病学研究[D];扬州大学;2015年

4 乔英琴;2014年重庆地区儿童诺如病毒腹泻分子流行病学研究[D];重庆医科大学;2015年

5 孔翔羽;2011-2014年我国部分地区诺如病毒的分子流行病学研究[D];中国疾病预防控制中心;2015年

6 周永康;中国札如病毒的流行特征及诺如病毒GⅡ.17不同毒株P蛋白的唾液结合分析[D];兰州大学;2016年

7 孙昼;杭州地区腹泻婴幼儿诺如病毒感染状况及危险因素研究[D];浙江大学;2010年

8 周晓红;食品与水中诺如病毒检测方法的建立及其在疫情暴发中的初步应用[D];暨南大学;2010年

9 桑少伟;诺如病毒急性胃肠炎分子流行病学调查研究[D];山东大学;2012年

10 吴微;2010-2011年深圳市诺如病毒的分子流行病学研究[D];华中科技大学;2013年

，

本文编号：1100585