衰老标记蛋白30对过氧化氢所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响

发布时间：2017-10-28 16:19

  本文关键词：衰老标记蛋白30对过氧化氢所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响

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【摘要】：目的观察高表达的衰老标记蛋白30(SMP30)对过氧化氢(H_2O_2)所致的正常人皮肤成纤维细胞(NHSF)衰老表型的影响。方法实验分为转染H_2O_2处理组(NHSF+SMP30+H_2O_2组)、转空载体H_2O_2处理组(NHSF+空载体+H_2O_2组)和转空载体组(NHSF+空载体组)。NHSF细胞分别转染人SMP30 c DNA或空载体pc DNA3.1(分别命名为NHSF+SMP30、NHSF+空载体),然后150μmol·L-1H_2O_2处理2 h。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法分析SMP30的表达,显微镜观察细胞形态,并检测与衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)、细胞活性氧(ROS)及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果人SMP30 c DNA明显上调了NHSF中SMP30的表达。NHSF+空载体+H_2O_2组SMP30 mRNA和蛋白表达水平明显低于NHSF+空载体组(P0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2组SMP30 mRNA和蛋白表达水平高于NHSF+空载体+H_2O_2组(P0.05)。NHSF+空载体+H_2O_2组较NHSF+空载体组SA-β-gal染色率明显增高(P0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2组较NHSF+空载体+H_2O_2组SA-β-gal染色率明显下降(P0.05)。NHSF+空载体+H_2O_2组较NHSF+空载体组ROS活性明显增高(P0.05),而SOD水平明显降低(P0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2组较NHSF+空载体+H_2O_2组ROS活性明显下降,而SOD水平明显上升(P0.05)。结论高表达的SMP30能够抑制细胞SA-β-gal和ROS的表达,同时上调SOD的活性。
【作者单位】： 湖北中医药大学中西医结合医院武汉市中西医结合医院皮肤科;湖北中医药大学基础医学院;
【关键词】： 衰老标记蛋白 过氧化氢 成纤维细胞 氧化应激 细胞衰老
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81101212,81574037) 湖北省自然科学基金资助项目(编号:2012ffc83,2015CFB577) 武汉市卫生局(卫生计生委)科研基金资助项目(编号:WX12B20,WX16D30) 武汉市中青年医学骨干人才培养工程基金资助项目(编号:2015)
【分类号】：R339.38
【正文快照】： 衰老标记蛋白30(senescence marker protein 30,SMP30)又称为钙调素[1],是最早在老鼠肝脏中被识别的一种新颖的衰老标记蛋白[2]。作者前期研究发现,SMP30可能介导了β-联蛋白延缓人皮肤成纤维细胞衰老[3]。为进一步明确SMP30是否具有抗人皮肤成纤维细胞(normal human skin fib

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本文编号：1109015