不同糖浓度对颌骨骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

发布时间：2017-10-28 18:14

  本文关键词：不同糖浓度对颌骨骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

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【摘要】：目的研究不同糖浓度对颌骨骨髓间充质干细胞(orofacial bonemesenchymal stem cells,OFMSCs)增殖和成骨分化的影响。方法体外分离、培养OFMSCs,成骨、成脂、成软骨分化诱导及鉴定,并使用不同含糖量培养基(5.5、11、16.5、25、44mmol/L)培养OFMSCs,以5.5mmol/L基准糖浓度为对照组,其余组为实验组。采用CCK-8及流式细胞仪检测各组OFMSCs的增殖活性及增殖指数,OFMSCs成骨诱导后4、7d检测碱性磷酸酶(ALP)活性,21d进行茜素红染色及矿化定量分析,同时用RT-PCR检测3、7、14及21d相关成骨基因Runx2、Osterix的表达。结果培养的OFMSCs成骨诱导21d后茜素红染色可见钙结节,成脂诱导14d后油红O染色可见红色脂滴,成软骨诱导14d后阿利新蓝染色可见蓝色胞浆;糖浓度在5.5~25mmol/L促进OFMSCs的增殖,但随着糖浓度的继续增加(25~44mmol/L),OFMSCs的增殖活性受抑制;成骨诱导时,随着培养液糖浓度升高,ALP活性呈剂量依赖性降低(P0.05);成骨诱导21d,茜素红染色和矿化定量分析显示,随着培养液糖浓度的升高,钙结节形成、矿化定量呈剂量依赖性减少;成骨诱导3、7、14及21d,RT-PCR检测结果显示,对照组Runx2、Osterix mRNA表达量高于实验组(P0.05),各组Runx2、Osterix mRNA表达量均出现先上调再下调的趋势。结论在一定范围的糖浓度内,糖浓度升高可促进OFMSCs的增殖;而糖浓度升高对成骨分化呈抑制效应。
【作者单位】： 重庆医科大学附属口腔医院;口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室;重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室;
【关键词】： 糖浓度 颌骨骨髓间充质干细胞 增殖 成骨分化
【基金】：国家自然科学基金(No.81470772) 重庆市医学科研项目(No.20141013,No.2015HBRC009) 重庆市自然科学基金(No.cstc2015jcyjA10028,No.cstc2016jcyjA0238)资助
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 糖尿病是一种严重威胁人类健康生命的代谢性疾病[1]。糖尿病患者常伴随骨代谢障碍和钙、磷代谢紊乱,可以引起继发性骨量减少及骨质疏松等糖尿病骨病。患者颌骨也会表现出相关变化,如牙槽骨萎缩及颌骨骨质疏松,继而引起牙齿的松动及脱落[2]。临床研究发现[3],糖尿病患者相对于

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本文编号：1109376