家蚕过敏原CSP5克隆表达、纯化鉴定及分析

发布时间：2017-11-09 08:29

  本文关键词：家蚕过敏原CSP5克隆表达、纯化鉴定及分析

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【摘要】：克隆家蚕过敏原CSP5(chemosensory protein 5precursor)基因,表达、纯化该蛋白,鉴定其免疫活性,并进行生物信息学分析。人工合成家蚕化学感受蛋白5前体CSP5基因,将其连接至pMD18-T克隆载体,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后进行纯化,用western blotting和ELISA鉴定其免疫学特性,并采用生物信息学方法预测CSP5蛋白的理化性质、三级结构、潜在B细胞抗原表位。本研究成功克隆了纯度较高的重组CSP5蛋白,测序鉴定蛋白分子质量约为14.25kD。重组过敏原CSP5能与家蚕过敏患者血清IgE发生特异性结合。生物信息学方法推导其潜在B细胞抗原表位为17~22、35~36、51~55、70~74、106~110、112~115。获得的重组蛋白CSP5具有与天然蛋白相似的免疫学活性,为以标准化抗原作为临床特异性诊断和治疗以及由家蚕引起的过敏性疾病的进一步研究奠定了基础。
【作者单位】： 深圳大学过敏反应与免疫学研究所;
【基金】：国家自然基金(81273275) 卫生部公益性行业科研专项(2015SQ00136) 广东省对外科技合作项目(2013B051000088)
【分类号】：R392
【正文快照】： 近年来,变态反应性疾病在世界各国的发病率逐步提高,总发病率高达10%~30%,被世界卫生组织视为当前世界性的重大卫生学问题[1-2]。过敏性哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮炎及过敏性眼结膜炎等多种疾病在临床上十分常见[3]。引起变态反应性疾病的变应原种类众多,其中蚕蛹体因高蛋白

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