H3亚型流感重组腺病毒的纯化工艺研究

发布时间：2017-11-17 08:07

  本文关键词：H3亚型流感重组腺病毒的纯化工艺研究

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【摘要】：目的为了探索经济、高效的腺病毒的纯化工艺,采用阴离子交换层析和分子筛层析两步法对H3亚型流感重组腺病毒pacAd-H3-EHA-H1HA1new进行纯化,并评价纯化效果。方法利用7L生物反应器培养HEK-293细胞,用于对H3型流感重组腺病毒进行扩增;利用冻融的方法使病毒从细胞中释放,通过阴离子交换层析和分子筛层析法纯化病毒,用分光光度计检测纯化样品的纯度,并测定病毒的滴度和回收率。结果纯化后的样品经PCR鉴定正确,纯化前后的病毒滴度分别为5.6×10~9 TCID_(50)/ml和1.1×10~(10) TCID_(50)/ml,纯化后样品纯度(A260/A280值)分别为2.01和1.26,阴离子交换层析纯化的回收率为31.5%,分子筛层析纯化的回收率为81.4%,总回收率为25.6%。结论利用阴离子交换层析和分子筛层析两步法纯化H3亚型流感重组腺病毒的回收率和滴度高,该方法可用于重组腺病毒的纯化。
【作者单位】： 吉林农业大学动物科学技术学院;军事医学科学院军事兽医研究所;吉林大学动物医学学院;
【基金】：国家863项目(No.2012AA02A403) 国际合作交流项目(No.2014DFA30290) 吉林省自然科学基金项目(No.20130101093JC)
【分类号】：R373.13
【正文快照】： *?**?流感病毒(influenza viruses,IV)每年的季节性流行造成约500 000人死亡,对人类的危害极大[1]。历史上有几次流感大流行,分别是1918年的西班牙H1N1流感,1957年亚洲H2N2流感,1968年香港H3N2流感和2009年墨西哥H1N1猪流感[2]。随着流感病毒的变异,流感病毒已经突破种属界限,

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