沙眼衣原体MIP蛋白的原核表达、纯化及免疫学特性鉴定

发布时间：2017-12-08 03:07

  本文关键词：沙眼衣原体MIP蛋白的原核表达、纯化及免疫学特性鉴定

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【摘要】：目的采用p GEX-6p载体原核表达沙眼衣原体(Ct)巨噬细胞感染增强因子(MIP),进一步纯化后免疫小鼠,评价该蛋白作为Ct疫苗候选抗原的可行性。方法聚合酶链反应技术从Ct D型基因组扩增MIP编码基因,构建p GEX-6p-1/MIP重组质粒并转化大肠杆菌,IPTG诱导重组菌表达GST-MIP融合蛋白,Pre Scission蛋白酶切除GST标签后免疫Balb/c小鼠,ELISA法检测MIP的免疫学特性。结果 MIP编码基因正确插入p GEX-6p-1载体,核苷酸序列与Gen Bank登陆的Ct D型MIP基因完全一致;重组融合蛋白在E.coli中稳定高效表达,酶切后纯度达90%以上;MIP蛋白具有良好的免疫原性,诱导小鼠产生高滴度特异性Ig G型抗体,亚型以Ig G2a为主;MIP免疫组小鼠脾淋巴细胞受MIP蛋白刺激,分泌高水平IFN-γ。结论重组表达的Ct MIP蛋白具有良好的免疫原性,能诱导小鼠产生高特异性的体液及细胞免疫应答,可进一步探讨其作为Ct亚单位疫苗的可行性。
【作者单位】： 南华大学病原生物学研究所;南华大学肿瘤研究所;
【基金】：国家自然科学基金(No.81202374和No.81471969) 2015年度湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目联合资助
【分类号】：R374.1
【正文快照】： 沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)是一类广义的胞内寄生菌,包括A、B、C、D等19种临床血清型,大量流行病学研究证实Ct血清型D-K与人类泌尿生殖道感染密切相关。Ct生殖道感染常起病隐匿,且临床症状不典型,因此很容易被忽视或不彻底治疗,从而使衣原体能在感染者体内持续存在

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本文编号：1264793