大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞、成骨细胞诱导分化及破骨细胞培养方法的建立

发布时间：2017-12-10 13:36

  本文关键词：大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞、成骨细胞诱导分化及破骨细胞培养方法的建立

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【摘要】：为建立稳定的大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞、成骨细胞诱导分化及破骨细胞培养的方法,为后续细胞共培养奠定实验基础。采用通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞的方法,进行形态学观察,并应用流式细胞术检测BMSCs免疫学表型,对其进行鉴定;将获得的第三代BMSCs向脂肪细胞和成骨细胞方向进行诱导分化,诱导21 d后的脂肪细胞应用油红O染色进行鉴定,成骨细胞应用茜素红染色进行鉴定;将获取的骨髓细胞液按照造血系单核干细胞诱导培养法向破骨细胞方向进行诱导分化,于28 d后进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色进行鉴定。结果显示,BMSCs体外培养14 d具有独特的细胞免疫学表型,流式细胞术检测,CD29+、CD44+表达量分别为97.92%和89.32%;在脂肪培养基诱导下,油红O染色阳性。在成骨培养基诱导下,茜素红染色阳性;骨髓细胞液在破骨培养基诱导下,抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性。由此可知,建立了稳定的大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞、成骨细胞诱导分化及破骨细胞诱导分化的培养方法。
【作者单位】： 石河子大学医学院/新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室;石河子大学医学院第一附属医院检验科;
【基金】：国家自然科学基金项目(81360142)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)是Friedenstein等[1]首先在骨髓基质间发现的来源于中胚层的一类具有自我更新及多向分化潜能的干细胞。有研究表明[2-5]BMSCs不同诱导条件下,可分化为脂肪、皮肤、成骨细胞、神经细胞、肝实质细胞、软骨等,BMSCs有

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本文编号：1274658