KSHV K15蛋白多克隆抗体的制备及其初步鉴定
本文关键词:KSHV K15蛋白多克隆抗体的制备及其初步鉴定 出处:《安徽医科大学学报》2016年01期 论文类型:期刊论文
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【摘要】:目的制备卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15蛋白多克隆抗体,并将其应用于细胞内K15蛋白的检测。方法选择K15基因第8个外显子(K15P_(ex8))序列做为模板,构建K15P_(ex8)的表达载体p QE-80L-K15P_(ex8)。诱导重组菌蛋白表达,免疫新西兰兔,制备抗K15P_(ex8)多克隆抗体,并用间接ELISA法测定抗体效价。将p FJ和p FJ-K15P两种重组质粒分别转入HEK 293T细胞,用Western blot法检测抗K15P_(ex8)多克隆抗体对K15P-Flag蛋白的识别。结果由K15P_(ex8)制备的抗K15P_(ex8)多克隆抗体效价大于1∶6 400,能特异性识别重组质粒p FJ-K15P转染293T细胞产生的K15P-Flag融合蛋白。结论初步证明K15P_(ex8)蛋白有免疫反应性,该多克隆抗体可用于重组的K15P-Flag融合蛋白的检测。
【作者单位】: 安徽医科大学微生物学教研室;
【基金】:国家自然科学基金(编号:81271837) 安徽高校省级自然科学研究项目(编号:KJ2012A161) 安徽医科大学博士科研经费资助项目(编号:XJ200914)
【分类号】:R392
【正文快照】: 2015-10-22接收卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-as-sociated herpesvirus,KSHV)又被称为人类疱疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8),于1994年Chang et al[1]在卡波氏肉瘤(Kaposi's sacoma,KS)组织中发现,是引起KS的病原体[2]。研究[3]证明KSHV还是原发渗液性淋巴
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