鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpK的原核重组表达与纯化

发布时间：2017-12-29 02:12

  本文关键词：鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpK的原核重组表达与纯化　出处：《中国病原生物学杂志》2017年09期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的通过分子克隆方法制备重组鲍曼不动杆菌外膜蛋白K(OmpK)并进行纯化,为进一步研究该蛋白的免疫活性奠定基础。方法采用PCR方法扩增鲍曼不动杆菌标准菌株ATCC19606外膜蛋白K编码基因,将该基因克隆入原核表达载体pColdI,构建重组质粒pColdI/OmpK。将重组质粒转化至大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导表达重组蛋白,通过镍亲和层析柱进行纯化。结果 PCR扩增获得大小约726bp的目的基因片段,将其克隆入原核表达载体pColdI后进行酶切和DNA测序分析,pColdI/OmpK构建正确,重组质粒转化BL21经IPTG诱导后表达目的蛋白(相对分子质量约30×103),经镍亲和纯化得到高纯度的重组OmpK。结论通过分子克隆技术使鲍曼不动杆菌OmpK蛋白在构建的原核表达系统中得到高效表达,并获得了高纯度的重组蛋白,为进一步研究鲍曼不动杆菌OmpK的免疫活性奠定了基础。
[Abstract]:......
【作者单位】： 川北医学院免疫与分子生物学研究所;
【基金】：四川省教育厅重点项目(No.17ZA0166)
【分类号】：R378
【正文快照】： ***鲍曼不动杆菌为继铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌之后又一常见院内感染病菌,感染对象主要为长期使用广谱抗菌药物和机械通气及长期住院的慢性病患者,在院内容易引起暴发流行,主要引起肺部感染,软组织或伤口感染、插管相关感染、尿路感染、菌血症和继发性脑膜炎等病症。鲍曼

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