人CAP1蛋白真核表达及细胞定位与功能

发布时间：2017-12-29 02:18

本文关键词：人CAP1蛋白真核表达及细胞定位与功能　出处：《西安交通大学学报(医学版)》2016年02期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的构建CAP1蛋白真核表达质粒并使之在细胞内得以表达,确定CAP1蛋白在细胞中的定位及其对细胞迁移的影响。方法以HeLa细胞cDNA为模板,经PCR获取CAP1编码区cDNA,将该编码区cDNA序列插入pCMV-Myc质粒中,构建带Myc标签的真核表达重组质粒。重组质粒转染至293细胞中,Western blot方法检测其在真核细胞内的表达;重组质粒转染HeLa细胞,免疫荧光法检测其细胞内的定位,划痕实验观察其对细胞迁移的影响。结果成功构建了CAP1真核表达重组质粒,并在真核细胞内成功表达,确定CAP1定位于细胞质中,划痕实验证明CAP1过表达的细胞迁移能力明显下降。结论在真核细胞中成功表达了CAP1重组质粒且CAP1定位于细胞质,其过表达对细胞迁移有抑制作用,为研究CAP1的生理功能奠定实验基础。
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【作者单位】：石河子大学生命科学学院;军事医学科学院放射与辐射医学研究所;石河子大学医学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.30960093,31160183,31270894,31470827)~~
【分类号】：R3416
【正文快照】： 细胞骨架在细胞形态发生、胞质分裂、胞吞作用、细胞迁移等诸多方面发挥作用。细胞骨架异常会诱发包括神经退行性疾病在内的多种人类疾病,并可影响肿瘤转移。肌动蛋白是细胞骨架的重要组成部分,单体肌动蛋白与多聚肌动蛋白间的动态平衡在细胞骨架调控系统中起关键作用[1-2]。

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