葡萄糖及O-GlcNAc糖基化对人骨髓间充质干细胞增殖、凋亡、衰老的影响

发布时间：2017-12-29 17:11

本文关键词：葡萄糖及O-GlcNAc糖基化对人骨髓间充质干细胞增殖、凋亡、衰老的影响　出处：《中国脊柱脊髓杂志》2016年04期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的:探讨微环境中不同浓度葡萄糖是否可通过蛋白质O位氮乙酰葡糖胺(O-Glc NAc)糖基化修饰影响人骨髓间充质干细胞增殖、周期、凋亡及衰老。方法:构建常规浓度葡萄糖(A组)(5.5mmol/L)、高浓度葡萄糖(B组)(25mmol/L)微环境模型及常糖糖基化(C组)(常糖+Thiamet-G 1.0mmol/L)、高糖糖基化(D组)(高糖+Thiamet-G 1.0mmol/L)细胞模型。人骨髓间充质干细胞在各组中培养,于第3、5、7天用WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒测定各组细胞增殖情况;于第5天用流式细胞仪检测各组细胞周期和细胞凋亡情况;于第7天用细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测各组细胞衰老情况;于第5天用Real-time PCR、Westen-bolt检测不同处理组Cyclin D1和caspase-3的表达水平。结果:第3、5、7天时细胞增殖结果显示,与A组相比,B组、C组和D组细胞增殖明显下降(P0.05)。细胞周期结果显示,B组、C组和D组相较于A组细胞周期G1期阻滞(P0.05)。细胞凋亡结果显示,与A组相比,B组、C组和D组凋亡明显增多(P0.05)。细胞衰老染色显示,与A组相比,B组、C组和D组细胞衰老明显增多(P0.05)。Real-time PCR结果显示,Cyclin D1的m RNA相对值A组、B组、C组和D组分别为1.01±0.31、0.31±0.07、0.42±0.1、0.18±0.04,其他三组显著低于A组(P0.05);caspase-3的m RNA相对值A组、B组、C组和D组分别为1.09±0.82、5.73±1.54、3.43±0.59、6.82±2.13,其他三组显著高于A组(P0.05)。Westen-bolt结果显示,A组h BMSCs内蛋白质O-Glc NAc糖基化水平高于B组;Cyclin D1的蛋白水平表达B组、C组和D组低于A组(P0.05),caspase-3的蛋白质水平表达B组、C组和D组高于A组(P0.05)。结论:微环境中高浓度葡萄糖和细胞蛋白质高水平O-Glc NAc糖基化修饰抑制人骨髓间充质干细胞增殖,阻滞细胞周期促进细胞凋亡及衰老。微环境中高浓度葡萄糖可诱导胞内蛋白质O-Glc NAc糖基化水平升高。微环境中高浓度葡萄糖诱导的蛋白质O-Glc NAc糖基化水平升高可能是其抑制增值促进凋亡和衰老的机制之一。
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【作者单位】：第三军医大学新桥医院骨科;武汉大学中南医院循证与转化医学中心;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81271982,81472076);国家自然科学基金青年科学基金项目(81401801)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 间充质干细胞因其较强的增殖能力和潜在的平,可能通过O-Glc NAc糖基化修饰影响相关蛋分化多能性[1~3]在再生医学领域有着广阔的发展白质活性进而影响细胞内的生物学过程,比如增前景。其可以从骨髓、脂肪及脐带血等多种组织中殖、凋亡和衰老等[18]。本研究拟通过观察微环境中获

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