重组质粒pcDNA3.1-Ag85A对人单核细胞活性的影响

发布时间：2017-12-29 23:25

  本文关键词：重组质粒pcDNA3.1-Ag85A对人单核细胞活性的影响　出处：《重庆医科大学》2011年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 人外周血单核细胞 Ag85A 活性

【摘要】：目的:研究结核分枝杆菌分泌抗原85A(Antigen85A,Ag85A)重组真核表达质粒pcDNA3.1-Ag85A转染人外周血单核细胞的特性,探讨目的基因Ag85A能否在单核细胞表达,从而制备具有免疫活性的人外周血单核细胞。方法:分离人外周血单核细胞并进行原代培养,流式细胞仪鉴定单核细胞纯度; Ag85A重组真核表达质粒pcDNA3.1-Ag85A转染单核细胞;RT-PCR检测目的基因Ag85A在单核细胞中的表达,目的蛋白Ag85A的表达采用Western Blot鉴定。从外周血分离得到T淋巴细胞,与转染后的单核细胞共同孵育,并设空质粒转染组、重组质粒+单核细胞为对照组,3天后用MTT法检测T淋巴细胞增殖情况。结果:人外周血单核细胞经原代培养6天后,获得大量高纯度的单核细胞,流式细胞术鉴定人单核细胞表面特异性标记CD14阳性的细胞高表达(98.35%);RT-PCR法鉴定表明Ag85A基因在转染单核细胞中成功转录,Western Blot证实转染后的单核细胞可合成目的蛋白Ag85A。与外周血T淋巴细胞共同孵育后,经转染重组质粒的单核细胞相对对照组,有更强的刺激T淋巴细胞增殖的能力。结论:Ag85A重组真核表达质粒pcDNA3.1-Ag85A成功转染人外周血单核细胞,目的基因Ag85A能在人单核细胞中的表达。经转染的外周血单核细胞有刺激外周血T淋巴细胞增殖能力,从而为结核病的疫苗的研制以及为患获得性免疫缺陷病的结核病人的治疗提供新途径。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R392.1

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 田玲;;重组IL-2直接增强人单核细胞的细胞毒性[J];国外医学情报;1987年20期

2 赵茜;抗CD_3促有丝分裂过程中人单核细胞IL-1 mRNA的诱导和分泌需要两个不同的T细胞来源的信号[J];国际免疫学杂志;1992年01期

3 吴移谋;曾焱华;邓仲良;詹利生;李忠玉;陈超群;;穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导人单核细胞产生炎症性细胞因子[J];中华传染病杂志;2006年04期

4 孙备;一种从芍药根中分离的具抑制人单核细胞白细胞介素-1β活性的新萜类化合物[J];国外医学.中医中药分册;1996年05期

5 曹军;姜丽平;耿成燕;姚晓峰;薛向欣;仲来福;;硼酸对脂多糖诱导的人单核细胞产生TNF-α的影响[J];免疫学杂志;2008年04期

6 李永伟;用过碘酸钠激活人外周单核细胞诱导抑制性细胞[J];国际免疫学杂志;1983年01期

7 陈锐;刘伟;刘建平;冯秀芝;丁年良;;EGCG通过ERK1/2途径抑制LPS诱导人单核细胞产生前炎性细胞因子[J];中国现代医生;2011年09期

8 俞用川;;人血中单核细胞体外合成IgE抗体:特应症病人与非特应症的正常人的比较[J];国际免疫学杂志;1984年01期

9 吴炯;重组白细胞介素-2直接增强人单核细胞的胞毒活性[J];国际免疫学杂志;1987年05期

10 任少华;;人单核细胞系吞噬结核分枝杆菌后的白介素-8分泌[J];国外医学(内分泌学分册);1993年02期

相关会议论文 前10条

1 周建娅;唐法娣;毛国根;卞如濂;;α-蒎烯对人单核细胞THP-1核因子-κB核转位活化的影响[A];中国药理学会第八次全国代表大会暨全国药理学术会议论文摘要汇编[C];2002年

2 周建娅;唐法娣;毛国根;卞如濂;;α-蒎烯对人单核细胞THP-1核因子-κB核转位活化的影响[A];中国药理学会第八次全国代表大会论文摘要集（第一部分）[C];2002年

3 蒋建平;侯凡凡;刘志强;刘俊;张训;;尿毒症病人单核细胞Fas的表达及血浆FasL水平[A];第六届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2000年

4 谭运年;成海恩;金亚平;;Rac1、Rac2参与调节人单核细胞趋化和NADPH氧化酶活性[A];2011年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2011年

5 于泳浩;李君;高硕;崔乃强;傅强;;糖皮质激素和IL-10对严重脓毒症病人单核细胞功能的影响[A];中华医学会急诊分会第五届全国危重病学术交流会论文汇编[C];2004年

6 曾晓坤;王宪;;同型半胱氨酸促进人单核细胞分泌趋化因子的机制[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年

7 徐丹;曲鹏;牛楠;王虹艳;崔颖;陈海英;高静;;锌指蛋白A20抑制Toll样受体4介导的人单核细胞炎症反应的实验研究[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年

8 王广;毛节明;王宪;;高同型半胱氨酸血症病人单核细胞分泌趋化因子增加[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年

9 韦多;陈旭林;李华涛;郇京宁;夏照帆;;脂多糖激活人单核细胞多条信号通路[A];全国烧伤创面处理、感染专题研讨会论文汇编[C];2004年

10 孙威;王广;张振民;王宪;;同型半胱氨酸增加人单核细胞和小鼠T细胞RANTES的分泌[A];中国生理学会第五届全国心血管、呼吸和肾脏生理学学术会议论文摘要汇编[C];2005年

相关重要报纸文章 前5条

1 ;古蔺肝苏的免疫调节作用[N];健康报;2007年

2 陶春祥;NO的抗炎作用研究[N];中国医药报;2004年

3 肖鑫;抑制骨肿瘤细胞因子找到[N];健康报;2001年

4 郑文;我首次发现一种趋化因子新作用[N];人民日报海外版;2001年

5 张梅珍;“霉女”多脏器发霉之谜被破解[N];中国医药报;2004年

相关博士学位论文 前10条

1 智良;内毒素激活人单核细胞的信号传导机制及中药对其影响[D];天津医科大学;2002年

2 宋宁静;M14黑素瘤细胞培养上清液对单核吞噬细胞系统影响的研究[D];中国协和医科大学;2006年

3 欧柏青;趋化因子Fractalkine及其受体在动脉粥样硬化发病中的作用及氟伐他汀/普罗布考的干预研究[D];中南大学;2008年

4 秦树林;人粒细胞集落刺激因子（hG-CSF）cDNA的克隆和表达[D];中国协和医科大学;1992年

5 葛晶;胰岛素对人酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶1基因转录调控的机制研究[D];华中科技大学;2007年

6 董春霞;过氧化物酶体增殖物激活型受体α配体抑制动脉粥样硬化血栓形成机制研究[D];华中科技大学;2006年

7 于家欢;儿茶酚胺调节人单核细胞来源树突状细胞迁移功能及其机制研究[D];第二军医大学;2010年

8 陈苏宁;伴有t（6；11）（q27；q23）易位的裸小鼠高致瘤性人单核细胞白血病细胞系SHI-1的建立和鉴定[D];苏州大学;2003年

9 徐志豪;不可分型流感嗜血杆菌（NTHI）致宿主细胞炎症反应的分子发病机制研究[D];浙江大学;2008年

10 陈海英;不稳定型心绞痛合并2型糖尿病患者单核细胞TLR4信号通路的变化及其调控机制[D];大连医科大学;2009年

相关硕士学位论文 前10条

1 许瑞;重组质粒pcDNA3.1-Ag85A对人单核细胞活性的影响[D];重庆医科大学;2011年

2 袁灵;ADMA对THP-1细胞的粘附、迁移和增殖作用的研究[D];昆明医学院;2010年

3 王萍;DNA甲基化对人单核细胞FcεRIγ亚基基因表达的调节及其在特应性皮炎发病中的作用[D];中南大学;2010年

4 马智会;sPLA_2-ⅡA慢病毒在人单核细胞中的表达及致动脉粥样硬化作用[D];福建医科大学;2011年

5 孙萍萍;感染人单核细胞THP-1前后钩端螺旋体外膜蛋白抗原表达差异性[D];浙江大学;2012年

6 姜南艳;HMGB1结构域和HMGB1A盒与LBPK95A融合基因的克隆表达及其生物学功能的初步研究[D];第四军医大学;2005年

7 刘耀婷;结核病感染过程中单核细胞表型变化及其机制的研究[D];苏州大学;2009年

8 李荟苹;TGF-β_1 siRNA对THP-1分泌细胞因子的影响[D];大连医科大学;2010年

9 王铮;S5a/angiocidin诱导人单核细胞白血病细胞THP-1分化的机制研究[D];第二军医大学;2011年

10 郝亮;金属离子诱导人单核细胞凋亡并释放肿瘤坏死因子的实验研究[D];南昌大学;2007年

，

本文编号：1352360