轮状病毒感染胆管上皮细胞对HMGB1表达及释放的影响
本文关键词:轮状病毒感染胆管上皮细胞对HMGB1表达及释放的影响 出处:《华中科技大学》2011年硕士论文 论文类型:学位论文
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【摘要】:目的:了解轮状病毒感染胆管上皮细胞对HMGB1 mRNA表达及蛋白释放的影响。 方法:1.体外培养小鼠胆管上皮细胞,设立对照组和实验组,实验组接种轮状病毒,对照组接种等量病毒培养液,24小时后免疫组化分析HMGB1表达。 2.体外培养小鼠胆管上皮细胞,设对照组、病毒组、SiRNA组,分别于12h、24h、36h、48h收集细胞和培养上清,RT-PCR及ELISA分别检测胆管上皮细胞HMGB1 mRNA表达及培养上清蛋白表达。 结果:1. HMGB1存在于正常胆管上皮细胞的胞核。 2.病毒感染后胞核HMGB1含量较正常明显下降。 3. 12h、24h胆管上皮细胞HMGB1 mRNA表达:病毒组表达较对照组升高(P0.01),SiRNA组表达较病毒组降低(P0.01)。 4. 36h、48h细胞培养上清HMGB1浓度:病毒组HMGB1蛋白浓度较对照组显著升高(P0.01 ),SiRNA组较病毒组显著降低(P0.01)。 结论:1.轮状病毒感染能引起胆管上皮细胞HMGB1 mRNA表达上调及胞外HMGB1蛋白浓度升高。 2. SiRNA干扰能有效抑制病毒感染引起的胞外HMGB1蛋白水平。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of rotavirus infection on HMGB1 mRNA expression and protein release in bile duct epithelial cells. Methods 1. Murine bile duct epithelial cells were cultured in vitro. Control group and experimental group were established. The experimental group was inoculated with rotavirus and the control group was inoculated with the same amount of virus culture medium. The expression of HMGB1 was detected by immunohistochemistry 24 hours later. 2. Murine bile duct epithelial cells were cultured in vitro. The cells were collected and supernatant were collected at 12h / 24h / 36h / 48h, respectively, in control group and virus group (SiRNA group). HMGB1 mRNA expression and culture supernatant protein expression were detected by RT-PCR and ELISA, respectively. Results 1. HMGB1 exists in the nucleus of normal bile duct epithelial cells. 2. Nuclear HMGB1 content decreased significantly after virus infection. 3The expression of HMGB1 mRNA in bile duct epithelial cells at 12 h and 24 h: the expression of HMGB1 mRNA in virus group was higher than that in control group (P 0.01). The expression of P0. 01 in SiRNA group was lower than that in virus group. 436h and 48h culture supernatant HMGB1 concentration: the concentration of HMGB1 protein in virus group was significantly higher than that in control group (P0.01). Compared with virus group, SiRNA group was significantly lower than that of virus group (P 0.01). Conclusion 1. Rotavirus infection can up-regulate the expression of HMGB1 mRNA and increase the concentration of extracellular HMGB1 protein in bile duct epithelial cells. 2. SiRNA interference can effectively inhibit the extracellular HMGB1 protein level induced by virus infection.
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R373
【共引文献】
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,本文编号:1365810
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