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MicroRNA-382对人脐带间充质干细胞生物学特性的影响

发布时间:2018-01-06 17:07

  本文关键词:MicroRNA-382对人脐带间充质干细胞生物学特性的影响 出处:《中国实验血液学杂志》2016年03期  论文类型:期刊论文


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【摘要】:目的:探讨microRNA-382(miR-382)对脐带间充质干细胞(hUC-MSC)生物学特性的影响,以更深入的了解miRNA在MSC生物学特性中的调节机制。方法:对贴壁培养的hUC-MSC分别以miR-382 mimics及miR-382 inhibitor转染,在倒置显微镜下观察细胞形态变化;使用CCK-8检测miR-382转染对hUC-MSC增殖的影响;分别使用油红O和茜素红染色检测miR-382对hUC-MSC成脂及成骨分化的影响,并使用氯化十六烷基吡啶溶解茜素红检测其吸光度值以定量分析成骨情况,以RT-PCR检测Runx2基因表达情况;使用RT-PCR方法检测miR-382对hUCMSC分泌细胞因子基因表达的影响。结果:miR-382对hUC-MSC的形态无影响;miR-382不影响hUC-MSC的增殖;miR-382可以抑制hUC-MSC成骨分化而不影响其成脂分化;miR-382可以影响hUC-MSC细胞因子基因的表达,如IL-6,IDO1,G-CSF,M-CSF和GM-CSF的表达。结论:miR-382可以抑制hUC-MSC的成骨分化,并对其所分泌细胞因子的基因表达产生影响。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of microRNA-382 miR-382 on the biological characteristics of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSC). In order to better understand the regulatory mechanism of miRNA in the biological characteristics of MSC. Methods: miR-382 mimics and miR-382 were used for hUC-MSC in adherent culture. Inhibitor transfection. Cell morphology was observed under inverted microscope. CCK-8 was used to detect the effect of miR-382 transfection on the proliferation of hUC-MSC. Oil red O and alizarin red staining were used to detect the effects of miR-382 on hUC-MSC adipogenesis and osteogenic differentiation. The absorbance value of alizarin red was measured with hexadecylpyridine chloride to quantitatively analyze the osteogenesis and the expression of Runx2 gene was detected by RT-PCR. The effect of miR-382 on the gene expression of cytokines secreted by hUCMSC was detected by RT-PCR method. MiR-382 did not affect the proliferation of hUC-MSC. MiR-382 could inhibit the osteogenic differentiation of hUC-MSC without affecting its adipogenic differentiation. MiR-382 can affect the expression of cytokine gene in hUC-MSC, such as IL-6, IDO1G-CSF. Conclusion: miR-382 can inhibit the osteogenic differentiation of hUC-MSC and affect the gene expression of cytokines secreted by it.
【作者单位】: 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室;
【基金】:天津市应用基础与前沿技术研究计划(14JCZDJC33000) 国家科技支撑项目(2013BAIO1BO9)
【分类号】:R329.28
【正文快照】: J Exp Hematol 2016;24(3):852-857间充质干细胞(MSC)是一种具有高度自我增殖及多向分化能力的成体干细胞。由于其具有独特的免疫调节及造血支持等能力,MSC在炎性疾病、自身免疫性疾病的治疗及造血干细胞移植中得到广泛的应用[1-3],而其生物学特性的调节机制成为目前研究的热

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