应用慢病毒载体携带HBV基因组DNA制备乙型肝炎病毒感染小鼠模型的影响因素分析

发布时间：2018-01-07 20:12

  本文关键词：应用慢病毒载体携带HBV基因组DNA制备乙型肝炎病毒感染小鼠模型的影响因素分析　出处：《病毒学报》2017年05期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：应用慢病毒载体构建不同HBV转导质粒,通过高压水动力法尾静脉注射小鼠,比较不同HBV转导质粒、剂量(5μg和10μg)、小鼠品系(Balb/c和C57BL/6)及鼠龄(6周龄和18周龄)对建立HBV感染模型的影响。不同的时间点尾静脉采血,ELISA检测血清HBsAg、HBeAg的表达水平及动力变化,Real-time PCR检测血清及肝组织病毒载量;免疫组织化学法检测肝组织HBcAg的定位与表达。1.3倍HBV基因组慢病毒载体转导质粒(pCSHBV1.3)优于1.1倍与1.2倍HBV基因组转导质粒(pCS-HBV1.1or pCS-HBV1.2);pCS-HBV1.3注射Balb/c小鼠后抗原表达维持时间短,抗体出现早;pCS-HBV1.3注射C57BL/6小鼠后,HBsAg、HBeAg抗原表达及血清HBV DNA水平维持时间长;且注射5μg质粒相对于10μg质粒注射小鼠后抗原表达维持时间更长;而6周龄和18周龄小鼠血清均可在较长时间内检测到HBsAg、HBeAg及HBV DNA的表达,但在注射后35周内,前者的表达量均高于后者;所有注射质粒的小鼠肝组织中均可检测到HBcAg的表达,且在血清HBV感染标志转阴时均可检测到肝内HBV DNA的存在。注射质粒的HBV基因组长度、剂量以及宿主的遗传背景均对建立乙肝成体转基因小鼠模型有影响,且发现以5μg含1.3倍HBV基因组的转导质粒pCS-HBV1.3注射6周龄C57BL/6小鼠,HBV抗原表达和HBV DNA水平维持时间长,更适合建立HBV持续感染模型。
[Abstract]:The expression of HBsAg , HBeAg and HBV DNA was detected by ELISA . The expression of HBsAg , HBeAg and HBV DNA was detected by ELISA . The expression of HBsAg , HBeAg and HBV DNA was detected by ELISA .

【作者单位】： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒学重点实验室;河北医科大学病原生物学教研室;北京大学医学部基础医学院;
【基金】：重大新药创制科技重大专项(项目号:2009ZX09102-237),题目:新型乙型肝炎疫苗的临床前研究~~
【分类号】：R-332;R512.62
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是部分双链DNA病毒,尽管HBV疫苗推广应用显著降低了HBV感染流行,但全世界约有20亿人感染了HBV,超过3.5亿人为持续感染者[1]。慢性乙型肝炎(CHB)感染易导致严重肝脏疾病,包括肝硬化、肝细胞癌。目前HBV的临床治疗效果并不理想,因而预防控制，

本文编号：1394048