抑制Runx2的表达增强BMP2诱导的干细胞成软骨分化
本文关键词：抑制Runx2的表达增强BMP2诱导的干细胞成软骨分化 出处：《中国生物工程杂志》2016年04期 论文类型：期刊论文
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【摘要】：目的:利用腺病毒介导RNA干扰抑制成骨分化关键转录调控因子Runx2(Runt-related transcription factor 2)的表达,研究其对骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成软骨分化的影响,并初步探讨相关机制。方法:利用腺病毒Ad-GFP、Ad-BMP2、Ad-SiRunx2感染C3H10T1/2细胞;共分4组:GFP组、BMP2组、BMP2+SiRunx2组和SiRunx2组。Alcian blue染色检测各组软骨细胞基质糖胺聚糖分泌;RTPCR检测Runx2、早期成软骨标志物(Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)及晚期成软骨标志物(Col10a1)mRNA表达水平;Western blot检测目的蛋白BMP2、Ⅱ型胶原(Col2a1)及X型胶原(Col10a1)的蛋白表达。结果:在BMP2诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化过程中,下调Runx2的表达可以增强Col2a1、Aggrecan及软骨细胞外基质糖胺聚糖的合成,抑制Col10a1的合成。结论:下调Runx2表达可以增强BMP2诱导间充质干细胞成软骨分化能力,并抑制软骨细胞的成熟和肥大。
[Abstract]:Objective: to inhibit the osteogenic differentiation by adenovirus-mediated RNA interference, a key transcriptional regulator Runx2 (. Runt-related transcription factor 2. To study its effect on bone morphogenetic protein 2bone morphogenetic protein 2. BMP2) induced mesenchymal stem cells differentiation. Methods: Ad-BMP2Ad-SiRunx2 was used to infect C3H10T1 / 2 cells. The matrix glycosaminoglycan secretion of chondrocytes was detected by blue staining in 4 groups: BMP2 SiRunx2 and SiRunx2. Alcian blue staining. RTPCR was used to detect Runx2 and early cartilage marker Col2a1). The mRNA expression level of Aggrecan) and the late chondrogenic marker, Col10a1a; The target protein BMP2 was detected by Western blot. Results: BMP2 induced chondrogenic differentiation of C3H10T1 / 2 cells. Down-regulating the expression of Runx2 could enhance the synthesis of Col2a1Ag-grecan and the extracellular matrix glycosaminoglycan in chondrocytes. Conclusion: down-regulation of Runx2 expression can enhance the chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells induced by BMP2 and inhibit the maturation and hypertrophy of chondrocytes.
【作者单位】： 重庆医科大学附属第一医院;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81371972)资助项目
【分类号】：Q78;R329.2
【正文快照】： 过度运动容易引起关节软骨损害[1],关节软骨修复能力很弱,且自体和异体软骨细胞移植虽然近期效果较好,但远期由于纤维软骨的形成,临床治疗效果一般不理想[2-3]。因此利用干细胞培养出正常的透明软骨进行软骨移植具有重要的临床意义。 间充质干细胞( mesenchymal stem cells,M
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，本文编号：1432860
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