流式细胞术分选小鼠肺泡巨噬细胞及鉴定

发布时间：2018-03-22 08:35

  本文选题：肺泡巨噬细胞　切入点：流式细胞术　出处：《安徽医科大学学报》2017年11期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的建立一种基于流式细胞术分离小鼠肺泡巨噬细胞(AM)的方法。方法小鼠肺脏在体外经胶原酶IV消化后获得单细胞悬液,再经CD11b和CD11c抗体标记,利用流式细胞仪分选获得CD11blowCD11c+AM,并经台盼蓝染色计数细胞活力,以及通过Real-time PCR和吞噬功能进行鉴定。结果流式细胞术分选小鼠肺脏单细胞悬液,获得CD11blowCD11c+细胞,纯度为(93±2)%,细胞活力为(80±5)%;Real-time PCR结果显示过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在该群细胞高表达(P0.001);细胞吞噬功能实验结果显示该群细胞具有较好的吞噬活性,吞噬率约为10%。结论建立了一种基于流式细胞术分选获得AM的方法,该方法获得的细胞纯度高,细胞活性好,可用于功能性实验。
[Abstract]:Objective to establish a flow cytometry method for isolation of mouse alveolar macrophage (AM). Methods single cell suspension was obtained from mouse lung after digested by collagenase IV in vitro, and then labeled with CD11b and CD11c antibody. CD11blowCD11c AMs were obtained by flow cytometry and counted by trypan blue staining, and identified by Real-time PCR and phagocytosis. Results CD11blowCD11c cells were obtained from single cell suspension of mouse lung by flow cytometry. The purity was 93 卤2, and the cell viability was 80 卤5. The results of Real-time PCR showed that the peroxisome proliferator activated receptor 纬 -PPAR- 纬 was highly expressed in the group, and the phagocytic function test showed that the colony had a good phagocytic activity. Conclusion A method based on flow cytometry was established to obtain AM by flow cytometry. This method has high cell purity and good cell activity and can be used in functional experiments.
【作者单位】： 安徽医科大学;军事医学科学院放射与辐射医学研究所;蛋白质组学国家重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(编号:31570901、81500428)
【分类号】：R392

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本文编号：1647935