Mac-1在破骨细胞分化中的作用

发布时间：2018-03-29 09:48

  本文选题：巨噬细胞分化抗原　切入点：破骨细胞　出处：《中国病理生理杂志》2017年03期

【摘要】：目的:探究巨噬细胞分化抗原1(Mac-1)分子在核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的破骨细胞分化中作用的分子机制。方法:取4周龄C57BL/6J小鼠脾细胞,用RANKL及巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)诱导,同时用抗CD11b及抗CD18的特异性抗体进行处理,1周后对细胞核和细胞骨架进行染色;用抗CD11b抗体、干扰CD11b基因的慢病毒及其对照空载病毒处理RANKL诱导的破骨细胞,1周后对细胞进行免疫荧光染色;取4周龄C57BL/6J小鼠脾细胞用RANKL及M-CSF诱导,同时用抗CD11b抗体、干扰CD11b的慢病毒及其对照空载病毒分别进行处理,1周后提取总蛋白进行Western blot检测。结果:CD11b抗体组和双抗体组的多核细胞形成率低于对照组和CD18抗体组,双抗体组和CD11b抗体组之间多核细胞形成率的差异不具有统计学显著性;免疫荧光双标结果显示病毒组的CD11b、Syk及NFATc1表达强度均低于对照病毒组,CD11b抗体组的CD11b、Syk及NFATc1表达强度均低于对照组;Western blot结果显示,CD11b抗体组的CD11b、Syk、NFATc1、c-Fos及p-ERK/ERK水平均低于对照组,病毒组的CD11b、Syk、NFATc1、c-Fos及p-ERK/ERK水平均低于对照病毒组。结论:Mac-1分子中CD11b亚基对破骨细胞分化具有促进作用。该分子通过激活下游Syk通路,上调c-Fos,增加ERK活性,最终上调NFATc1而促进破骨细胞的分化。
[Abstract]:Aim: to explore the molecular mechanism of macrophage differentiation antigen 1 (Mac-1) in osteoclast differentiation induced by nuclear factor 魏 B receptor activating factor ligand RANKL. Methods: spleen cells of C57BL/6J mice at 4 weeks of age were harvested. RANKL and macrophage colony stimulating factor (MCSF) were used to induce cell nuclear and cytoskeleton staining with anti CD11b and anti CD18 specific antibodies for 1 week. Lentivirus interfering with CD11b gene and its control empty virus treated osteoclasts induced by RANKL for 1 week were stained with immunofluorescence, spleen cells of 4-week-old C57BL/6J mice were induced by RANKL and M-CSF, and anti-#en3# antibody was used. Lentiviruses that interfered with CD11b and their unloaded control viruses were treated for 1 week, and the total protein was extracted for Western blot detection. Results the polynuclear cell formation rate of the two groups was lower than that of the control group and the CD18 antibody group, and the percentage of polynuclear cells in the two groups was lower than that in the control group and the CD18 antibody group. There was no significant difference in the polynuclear cell formation rate between the double antibody group and the CD11b antibody group. The results of double labeling immunofluorescence showed that the expression intensity of CD11btc and NFATc1 in the virus group was lower than that in the control group compared with the control group. The results of Western blot showed that the levels of CD11bSK and p-ERK/ERK in the anti-CD11b antibody group were lower than those in the control group, and the results showed that the expression of CD11btc1c-Fos and p-ERK/ERK in the anti-CD11b antibody group was lower than that in the control group. The levels of c-Fos and p-ERK/ERK in the viral group were lower than those in the control group. Conclusion the CD11b subunit of the 1: Mac-1 molecule can promote the differentiation of osteoclasts by activating the downstream Syk pathway, upregulating c-Fosand increasing the activity of ERK. Finally, NFATc1 was upregulated and osteoclast differentiation was promoted.
【作者单位】： 第四军医大学附属西京医院骨一科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81301541)
【分类号】：R329.2

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本文编号：1680593