肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的表达及鉴定

发布时间：2018-04-10 09:54

  本文选题：肺炎支原体　切入点：CARDS毒素蛋白　出处：《中国人兽共患病学报》2017年07期

【摘要】：目的探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的免疫反应活性。方法对CARDS毒素蛋白的抗原表位进行分析,选取10个重要的表位进行拼接,反向翻译后合成并克隆,插入pET28a表达载体构建pET-CARDS表达质粒并转入受体菌。经IPTG诱导表达的多表位拼接CARDS蛋白使用6×His单克隆抗体和人阳性血清进行了免疫印迹的检测。结果 CARDS毒素蛋白的多表位拼接抗原表达载体构建成功,诱导后表达大小为30KDa的重组蛋白,Western blot测定其能与6×His单克隆抗体和人阳性血清发生反应。结论本研究选取的CARDS毒素蛋白抗原表位具有较强的免疫活性,可为Mp感染的诊断提供新的候选抗原。
[Abstract]:Objective to investigate the immunoreactivity of multiple epitope splicing antigen of mycoplasma pneumoniae CARDS toxin protein.Methods the antigenic epitopes of CARDS toxin protein were analyzed, 10 important epitopes were spliced, synthesized and cloned after reverse translation, then inserted into the pET28a expression vector to construct pET-CARDS expression plasmid and transferred to the receptor bacteria.The multiepitope spliced CARDS protein induced by IPTG was detected by Western blot using 6 脳 His monoclonal antibody and human positive serum.Results the multiepitope splicing antigen expression vector of CARDS toxin protein was successfully constructed. After induction, the recombinant protein expressed in the size of 30KDa could react with 6 脳 His monoclonal antibody and human positive serum by Western blot.Conclusion the antigenic epitopes of CARDS toxin protein selected in this study have strong immunological activity and can provide new candidate antigens for the diagnosis of MP infection.
【作者单位】： 沈阳农业大学;沈阳药科大学;中国医科大学;
【基金】：辽宁省社会科学发展基金(No.20122225019)项目资助~~
【分类号】：R392

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本文编号：1730719