表达森林脑炎病毒NS5蛋白的转基因小鼠模型构建与鉴定

发布时间：2018-04-11 21:11

  本文选题：森林脑炎病毒 + NS蛋白　； 参考：《中华医院感染学杂志》2017年01期

【摘要】：目的建立能够表达森林脑炎病毒NS5蛋白的转基因小鼠模型,为评价TBEV感染时RdRp酶的活性提供研究平台。方法将线性化的pRP.ExBi-EF1α-NS5-IRES-eGFP质粒显微注射入FVB/N小鼠受精卵雄原核,移入假孕母鼠输卵管内,构建并筛选转基因首建鼠;首建鼠传代并筛选出遗传性状稳定的纯合子转基因小鼠;检测TBEV NS5基因的表达。结果成功筛选出5只转基因首建鼠并传代至F5代,PCR、RT-PCR及Western blot检测结果表明,转基因小鼠成功表达了TBEV NS5基因。结论成功构建了表达森林脑炎病毒NS5蛋白的转基因小鼠模型。
[Abstract]:Objective to establish a transgenic mouse model to express protein NS5 of tick borne encephalitis virus infection, for the evaluation of TBEV RdRp activity to provide research platform. Methods the linearized pRP.ExBi-EF1 plasmid FVB/N alpha -NS5-IRES-eGFP microinjected into the male pronucleus of mouse fertilized eggs, into pseudopregnant females fallopian tubes were constructed transgenic mice; first built in the passage and screening of homozygous transgenic mice genetically stable; to detect the expression of TBEV NS5 gene. Results successfully screened 5 transgenic mice and passaged to F5 generation, PCR, RT-PCR and Western blot detection results showed that transgenic mice successfully expressed TBEV NS5 gene was successfully constructed. Conclusion the expression of transgenic mouse model tick borne encephalitis virus NS5 protein.

【作者单位】： 第四军医大学基础医学部微生物学教研室;解放军第152医院检验科;解放军总医院口腔医学研究所;第四军医大学西京医院输血科;解放军总医院院办;
【基金】：全军后勤科研计划面上项目(CWS13J056)
【分类号】：R373.31;R-332

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本文编号：1737690