Bcl-2在骨骼肌远隔后处理心脏保护中的作用及机制

发布时间：2018-04-28 15:31

  本文选题：骨骼肌 + 远隔缺血后处理　； 参考：《河北医科大学》2012年硕士论文

【摘要】：目的：前期研究表明，Bcl-2可以介导骨骼肌远隔后处理对心脏的保护作用（待发表）。本研究预观察Bcl-2对骨骼肌远隔后处理的心脏保护作用是否被线粒体通透性转换孔（Mitochondrial Permeability TransitionPore，mPTP）启闭调节，是否经线粒体ATP敏感的钾通道（MitochondrialATP-Sensitive K+Channels，mKATP）启闭调节及mPTP与mKATP的相对位置如何？ 方法：健康新西兰大白兔30只，随机分为5组(n=6)，开胸结扎冠状动脉左室支45分钟，之后进行2小时再灌注制作缺血再灌注模型。同时行双侧髂外动脉固定部位短暂结扎5min制作骨骼肌短暂缺血模型。随机分组如下：缺血再灌注组(Con)、骨骼肌远隔后处理组(RemotePost-conditioning，RPostC)、骨骼肌远隔后处理组+HA14-1+CsA （RPostC+HA14-1+CsA）、骨骼肌远隔后处理组+5HD（RPostC+5HD）、骨骼肌远隔后处理组+HA14-1+CsA+5HD（RPostC+HA14-1+CsA+5HD）。其中，HA14-1(2mg/kg)是选择性Bcl-2抑制剂；CsA（5mg/kg)是直接mPTP开放抑制剂；5HD（5mg/kg），即5羟基奎酸盐，一种线粒体ATP敏感的钾通道阻断剂。然后以Evans蓝标记心肌缺血区范围，以TTC法检测心肌梗死范围,并分别于缺血前、后及再灌注1、2小时测定血浆磷酸肌酸激酶(CK)活性和乳酸脱氢酶（LDH）含量。 结果： 1．血流动力学指标 在冠状动脉缺血前，各组间HR和MAP差异无统计学意义（P0.05）。在冠状动脉缺血期间，各组间HR均呈上升趋势、MAP均呈下降趋势，但是这种变化各组间无统计学差异（P0.05）。 2．心律失常观察 2.1心律失常类型： 在基础状态下，各组均未发生任何心律失常。在冠状动脉缺血后，出现多种形式心律失常，其中包括室性早搏、室早二联律、短阵室速，心室颤动（给予抗心律失常药物利多卡因后可终止），其中以室性早搏为主，各组早搏（室早二联律和短阵室速发生次数较少，故均以早搏个数统计）分别为：Con组：82.5±25.44个；RPostC组：177.5±201.73个；RPostC+HA14-1+CsA组：62.83±43.91个；RPostC+5HD组：161.67±150.26个；RPostC+HA14-1+CsA+5HD组：138.33±83.43个。但各组间心律失常的发生无统计学差异（P0.05）。仅前期研究RPostC+HA14-1组于缺血期出现心室颤动1次，给予抗心律失常药物（利多卡因）后立即终止。 2.2心律失常发生时间 在冠状动脉缺血前，各组均未发生任何心律失常。冠状动脉缺血后，出现多种形式心律失常，但多发生于冠状动脉缺血后15min内，各组早搏分别为：Con组：67±25.05个；RPostC组：152.33±166.92个；RPostC+HA14-1+CsA组：50.33±32.14个；RPostC+5HD组：107.5±133.56个；RPostC+HA14-1+CsA+5HD组：110±68.32个。但各组间缺血15min内室性早搏的发生次数无统计学差异（P＞0.05）。缺血15min后心律失常明显减少，各组早搏分别为：15±0.84个、23.4±42.79个、12±12.86个、52.67±85.4个、16.17±12.29个。且各组间缺血15min后心律失常的发生亦无统计学差异（P＞0.05）。再灌注心律失常多发生于再灌注开始后10min之内，再灌注10min后心律失常明显减少或者消失。本次实验中，各组间再灌注心律失常的发生次数较少，且各组间相比均无统计学差异（P＞0.05）。 3．心肌缺血及梗死程度测定 3.1心肌缺血程度的测定 从本研究得出：Con组、RPostC组及RPostC+HA14-1组缺血面积分别为：41.04±6.44%、34.09±6.67%、40.77±2.39%，但其三组间缺血程度无统计学意义（P＞0.05）。在此基础上，我们进一步研究得出，RPostC+HA14-1+CsA组缺血面积为36.79±3.71%；RPostC+5HD组缺血面积为35.52±4.08%；RPostC+HA14-1+CsA+5HD组缺血面积为：42.41±5.99%。且Con、 RPostC、 RPostC+HA14-1+CsA、 RPostC+5HD及RPostC+HA14-1+CsA+5HD各组间心肌缺血程度亦无显著性差异（P＞0.05）。 3.2心肌梗死程度的测定 与Con组相比，RPostC组梗死面积明显减少（29.54%±5.38%vs66.18%±9.68%，P＜0.05）。 前期研究表明：与RPostC组相比，RPostC+HA14-1组梗死面积明显增加（68.75%±10.75%vs29.54%±5.38%，P＜0.05）。 与RPostC+HA14-1组相比，RPostC+HA14-1+CsA组梗死面积明显减少（57.44±5.71%vs68.75±10.75%，P＜0.05）。 与RPostC组相比， RPostC+5HD组心肌梗死面积明显增加（56.48±14.06%vs29.54±5.38%，P＜0.05）。 与RPostC+HA14-1+CsA组相比，RPostC+HA14-1+CsA+5HD组心肌梗死面积明显增加（65.6±14.06%vs57.44±5.71%，P＜0.05）。 4．血清肌酸激酶（CK）及乳酸脱氢酶（LDH）的变化 前期研究表明：与Con组相比，RPostC组于再灌注60min末及再灌注120min末LDH有减少趋势，，分别为：再灌注60min末：312.97±116.73U/Lvs421.93±168.32U/L；再灌注120min末：347.75±94.07U/Lvs440.57±149.54U/L。与RPostC组相比，RPostC+HA14-1组再灌注120min末LDH有上升趋势，分别为：498.47±62.22U/L vs347.75±94.07U/L，但这种变化无统计学差异，且Con、RPostC、RPostC+HA14-1三组间CK及LDH均无显著性差异（P0.05）。 从本研究看出：与RPostC+HA14-1组相比，RPostC+HA14-1+CsA组再灌注60min末LDH含量呈下降趋势，分别为：344.32±105.36U/L vs433.78±103.06U/L，但这种变化无统计学意义（P0.05）。与RPostC组相比，RPostC+5HD组再灌注60min、再灌注120min末LDH含量呈上升趋势，分别为：322.77±94.35U/L vs312.97±116.73U/L、357.05±66.2U/L vs347.75±94.07U/L，但这种变化无统计学意义（P0.05）。且Con组、RPostC组、RPostC+HA14-1+CsA组、RPostC+5HD组及RPostC+HA14-1+CsA+5HD组间相比，CK及LDH无显著性差异（P0.05）。 结论： 1.Bcl-2可以介导骨骼肌远隔后处理的心脏保护作用。 2.Bcl-2介导的骨骼肌远隔后处理的心脏保护作用经mKATP和mPTP启闭调节，Bcl-2可能位于mPTP上游。 3.mKATP和mPTP可能处于同一反应链上。
[Abstract]:Objective: Previous studies have shown that Bcl-2 can mediate the protective effect of skeletal muscle distant post-processing on the heart (to be published). This study is to observe whether the cardiac protective effect of Bcl-2 on the distant post-processing of skeletal muscle is regulated by the Mitochondrial Permeability TransitionPore (mPTP) opening and closing, and whether the mitochondrial ATP is sensitive to the mitochondrial ATP sensitivity. How is the opening and closing regulation of MitochondrialATP-Sensitive K+Channels (mKATP) and the relative position of mPTP and mKATP?
Methods: 30 healthy New Zealand white rabbits were randomly divided into 5 groups (n=6). The left ventricular branch was ligation of the coronary artery for 45 minutes. After 2 hours of reperfusion, the ischemia reperfusion model was made for 2 hours. At the same time, the transient ischemia model of skeletal muscle was made by ligating the fixed part of the bilateral external iliac artery to make the skeletal muscle transient ischemia model. The following groups were randomly divided into ischemic reperfusion group (Con), bone RemotePost-conditioning (RPostC), +HA14-1+CsA (RPostC+HA14-1+CsA) in the post-processing group of skeletal muscle, +5HD (RPostC+5HD) in the post-processing group of skeletal muscle, and +HA14-1+CsA+5HD (RPostC+HA14-1+CsA+5HD) in the post-processing group of skeletal muscle. HA14-1 (2mg/kg) is a selective Bcl-2 inhibitor; CsA (CsA) is direct. An open inhibitor; 5HD (5mg/kg), 5 hydroxy quetiate, a mitochondrial ATP sensitive potassium channel blocker. Then, the range of myocardial ischemia area was marked with Evans blue, the range of myocardial infarction was detected by TTC, and the activity of kinase (CK) and lactate dehydrogenase (LDH) in plasma were measured before and after ischemia, and after reperfusion for 1,2 hours respectively.
Result锛

本文编号：1815856