海藻酸盐支架修复RA软骨缺损的关键技术的实验研究

发布时间：2018-05-24 21:16

本文选题：海藻酸盐 + 骨髓间充质干细胞　；参考：《宁波大学》2012年硕士论文

【摘要】：【目的】：应用骨髓间充质干细胞组织工程技术，以海藻酸盐作为支架，进行治疗类风湿性关节炎的动物实验研究。探讨海藻酸盐组织工程技术治疗类风湿性关节炎的可靠方法，通过动物实验研究海藻酸盐支架修复RA软骨缺损的关键技术。为临床应用该技术治疗RA提供实验基础和科学数据。【方法】：将新西兰长耳白兔分为正常对照组、佐剂性模型组和海藻酸盐支架治疗组。模型组和治疗组兔膝关节内注入弗氏完全佐剂建立佐剂性关节炎模型，对照组兔膝关节则注射等量生理盐水。取治疗组的骨髓，用percoll法分离出骨髓间充质干细胞，体外培养并传代，传至P3代用诱导培养液诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化，，并制备好海藻酸盐支架。将诱导成功的软骨细胞与制作好的海藻酸盐支架混合注入治疗组的新西兰长耳白兔病变膝关节。对照组和模型组关节注射等量的生理盐水。治疗一个月后处死兔，观察正常组、治疗组、模型组的兔膝关节，取兔子的膝关节进行HE染色和免疫组织化学染色，观察海藻酸盐支架修复关节软骨的情况。【结果】：原代培养的骨髓间充质干细胞成梭形，漩涡状生长，诱导分化后的细胞呈现多角形，诱导成软骨的细胞经II型胶原免疫组化和阿利新蓝染色显阳性，并且RT-PCR检测有II型胶原mRNA表达。诱导成功的软骨细胞和制备完毕的支架混合，并测试支架的机械强度为20.05g/cm~2。组织形态学结果显示，治疗组与模型组比较，治疗组关节炎症反应明显减轻，软骨缺损得到明显修复。【结论】：以骨髓间充质干细胞为种子细胞，经过诱导分化为软骨细胞并制备海藻酸盐支架，可在一定程度上促进兔佐剂性关节炎软骨缺损的修复。
[Abstract]:Objective : To study the technique of bone marrow mesenchymal stem cell tissue engineering to treat rheumatoid arthritis by using alginate as scaffold . The key technology of alginate scaffold in treating rheumatoid arthritis is discussed . The key technology of repairing RA cartilage defect with alginate scaffold is studied through animal experiment . The experimental foundation and scientific data are provided for clinical application of this technique to treat RA .

Methods : New Zealand white rabbits were divided into normal control group , adjuvant model group and alginate scaffold treatment group . The model group and the treatment group rabbits were injected with adjuvant arthritis model .

The results showed that the bone marrow mesenchymal stem cells cultured in primary culture were spindle - shaped and spiral - shaped , and the cells after induced differentiation showed polygonal shape , and the cells induced into the cartilage were positive by type II collagen immunohistochemistry and alissilla staining , and the mechanical strength of the scaffold was 20.05 g / cm ~ 2 . The results showed that the inflammatory response of the treated group was obviously reduced compared with the model group , and the cartilage defect was obviously repaired .

Conclusion : Bone marrow mesenchymal stem cells are used as seed cells to induce differentiation into chondrocytes and to prepare alginate scaffolds , which can promote the repair of articular cartilage defects in rabbits to some extent .
【学位授予单位】：宁波大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R329

【参考文献】

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1 龙华;袁华;马保安;周勇;鱼兵;裘秀春;范德刚;范清宇;;腺病毒介导TGF-β_1及BMP-7基因共表达感染骨髓基质干细胞修复兔关节软骨缺损[J];中国骨与关节损伤杂志;2008年06期

2 杨渊 ,陆敏安;关节软骨缺损修复的研究进展[J];广西医学;2002年12期

3 王碧;覃松;杨意;阮尚全;;海藻酸钠—硫酸软骨素共混膜的结构及性能研究[J];化学研究与应用;2007年07期

4 王金良;赵建宁;;复合支架材料在软骨组织工程中的研究进展[J];医学研究生学报;2009年02期

5 韩宁波;赵建宁;;软骨组织工程支架材料的研究进展[J];医学研究生学报;2010年01期

6 池雷霆,裴福兴;关节软骨缺损的治疗进展[J];临床骨科杂志;2000年03期

7 张奇峰;邱汉婴;褚红涛;张长翼;;兔骨髓间充质干细胞分离方法的比较[J];汕头大学医学院学报;2007年02期

8 陈任安;刘利;刘强;郝淼旺;杜鹃;曹义战;梁英民;;体外诱导兔骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞的实验研究[J];现代肿瘤医学;2008年08期

9 朱伟南;陈鸿辉;李爱国;金海燕;;兔骨髓基质干细胞诱导分化为软骨细胞的体外实验研究[J];实用医学杂志;2005年22期

10 李鹏翠;卫小春;丁娟;;海藻酸钠载体中成年兔关节软骨细胞生长情况[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年48期