抗鼠跨膜型TNF-α多克隆抗体设计和制备

发布时间：2018-05-26 20:55

  本文选题：跨膜型TNF-α + 多克隆抗体　； 参考：《暨南大学学报(自然科学与医学版)》2017年01期

【摘要】：目的:设计和制备区分鼠跨膜型肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和分泌型TNF-α的多克隆抗体.方法:采用抗原肽预测软件对跨膜型TNF-α表位进行预测,合成跨膜型TNF-α24个氨基酸多肽,并与匙孔碱血蓝蛋白偶联,家兔皮背部多点注射,收集分离血清,采用酶联免疫吸附试验和流式细胞术鉴定其特异性.结果:制备出高效价的抗血清,该抗血清可特异性结合免疫原多肽,不与分泌型TNF-α发生交叉反应,流式细胞术显示该抗血清可与细胞系NIH 3T3表达的跨膜型TNF-α发生特异性结合.结论:成功制备了跨膜型TNF-α特异性多克隆抗体,为区分跨膜型TNF-α和分泌型TNF-α生物学作用提供了新工具.
[Abstract]:Aim: to design and prepare polyclonal antibodies against transmembrane tumor necrosis factor- 伪 (TNF- 伪) and secretory TNF- 伪 (TNF- 伪). Methods: the antigenic peptide prediction software was used to predict the transmembrane TNF- 伪 epitope. 24 amino acid peptides of transmembrane TNF- 伪 were synthesized and coupled with keyhole alkaloid hemocyanin. The rabbit skin was injected with multiple points to collect and isolate serum. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) and flow cytometry (FCM) were used to identify its specificity. Results: a high titer antiserum was prepared. The antiserum could specifically bind to the immunogen peptide and did not cross react with secretory TNF- 伪. Flow cytometry showed that the antiserum could specifically bind to the transmembrane TNF- 伪 expressed in cell line NIH 3T3. Conclusion: transmembrane TNF- 伪 specific polyclonal antibody was successfully prepared, which provides a new tool for distinguishing the biological effects of transmembrane TNF- 伪 and secretory TNF- 伪.
【作者单位】： 贵州省骨科医院检验科;贵州省人民医院检验科;
【基金】：贵州省科学技术基金(20142086)
【分类号】：R392

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本文编号：1938861