PreS-Tat真核表达载体的构建及表达

发布时间：2018-05-30 20:36

  本文选题：PreS + Tat　； 参考：《郑州大学学报(医学版)》2011年05期

【摘要】：目的:构建pEGFP-PreS-Tat嵌合载体并在真核细胞中表达。方法:提取人乙型肝炎病毒并用PCR法扩增出PreS片段,定向克隆入pEGFP-C3载体,在PreS下游连接合成的Tat序列,构建成功的pEGFP-PreS-Tat质粒经脂质体转染Hela细胞,Westernblot鉴定目的蛋白的表达。结果:酶切和测序结果表明成功地构建了pEGFP-PreS-Tat嵌合载体,WesternBlot结果表明该载体能在Hela细胞中表达pEGFP-PreS-Tat融合蛋白。结论:成功构建pEG-FP-PreS-Tat载体并表达出相应的融合蛋白,为研究该融合蛋白的功能奠定了基础。
[Abstract]:Objective: to construct pEGFP-PreS-Tat chimeric vector and express it in eukaryotic cells. Methods: human hepatitis B virus (HBV) PreS fragment was amplified by PCR and cloned into pEGFP-C3 vector. The recombinant pEGFP-PreS-Tat plasmid was constructed by lipofectin transfection into Hela cells to identify the expression of the target protein by Western blot. Results: pEGFP-PreS-Tat chimeric vector was successfully constructed by restriction endonuclease digestion and sequencing. The results showed that the vector could express pEGFP-PreS-Tat fusion protein in Hela cells. Conclusion: the pEG-FP-PreS-Tat vector was successfully constructed and the corresponding fusion protein was expressed, which laid a foundation for studying the function of the fusion protein.
【作者单位】： 郑州大学第一附属医院药学部;郑州大学第一附属医院感染科;郑州大学护理学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目30472031
【分类号】：R373

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本文编号：1956725