肺炎克雷伯菌的血清分型及毒力基因分布的研究

发布时间：2018-06-01 18:49

  本文选题：肺炎克雷伯菌 + 血清型　； 参考：《重庆医科大学》2012年硕士论文

【摘要】：研究目的：肺炎克雷伯菌为革兰氏阴性杆菌，广泛分布于自然界，亦存在于健康人与动物的呼吸道和肠道中。当机体免疫力下降或长期使用抗生素导致菌群失调时可引起感染。感染类型主要包括：肺炎、脑膜炎、肝脓肿、眼内炎、泌尿系统发炎、伤口感染、败血症等。近年来，肺炎克雷伯菌已成为仅次于大肠杆菌的第二大条件致病菌，是引起社区获得性感染与医院院内感染不可忽视的潜在病原体。肺炎克雷伯菌毒力因子主要包括：荚膜多糖（K抗原）、Ⅰ型菌毛、脂多糖（O抗原）、铁摄入能力等。荚膜多糖是肺炎克雷伯菌的主要毒 力因子。根据荚膜多糖（K抗原）分型，可将肺炎克雷伯菌分为82个K血清型。其中K1、K2和K5血清型与人和动物体的严重感染性疾病有密切关系。K1型菌株通常导致弗里德兰德杆菌性肺炎，尤为突出的是化脓性肝脓肿并发症。K2和K5血清型通常导致社区获得性肺炎。鼻硬结病则与K3血清型相关。临床分离自萎缩性鼻炎的肺炎克雷伯鼻炎亚种大多来自K4血清型和极少数K5血清型。K54和K57型菌株与群体侵入性肝脓肿综合征发病相关。相比其他血清型，K1、K2、K54和K57型为强毒力菌株，常见于肺炎病例中。尤其以K1和K2型毒力最强，近年来流行趋势日趋严重，已成为临床细菌性肝脓肿综合征的主要致病菌。 目前国内有关肺炎克雷伯菌的分离及鉴定、耐药情况、产ESBLs的情况以及相关危险因素、流行病学方面研究报道较多，而缺乏荚膜血清型和毒力基因方面的相关研究。因此我们对肺炎克雷伯菌临床分离株进行K血清型和毒力基因的检测，欲了解我国重庆、北京、深圳三地肺炎克雷伯菌株的血清型分布及流行趋势，分析其毒力基因的分布特点和缺失情况，根据其分离菌株可能携带的毒力基因对其可能导致的疾病做出推测，从而为我国的肺炎克雷伯菌株分型、溯源、合理治疗奠定理论基础。 研究对象与方法：在本研究中，我们对来自我国重庆、北京、深圳三地的310株肺炎克雷伯菌株临床分离株，通过提取菌株基因组DNA。采用聚合酶链反应技术，选用PCR的靶基因包括肺炎克雷伯菌体外溶血酵素基因khe及其毒力相关基因。PCR的反应体系为30μL体系，反应条件为：95℃预变性3min；94℃变性40S，退火温度48-58℃退火40S，72℃延伸1min，共30个循环。最终对其进行K血清型检测和毒力基因的筛查。 研究结果：经PCR检测后发现，310株菌中，K1、K2、K54、K57、K3、K5和K20型分别占14.2%、9.4%、6.5%、4.2%、2.5%、2.3%和1.9%。来自呼吸系统标本的分离株中K1血清型菌株在4种检测的强毒血清型中占首位，为呼吸系统总数的17.4%。11种毒力基因都出现不同程度的缺失现象，无论是来自总体还是分别来自重庆、北京、深圳三地，其菌株中的ureA、wabG和fimH毒力因子检出率均较高，相对的，iroNB毒力因子检出率均为最低。各个血清型菌株中，ureA和wabG检出率最高，均为阳性结果。除K5血清型外，iroNB检出率均为最低。研究结论：结果显示310株肺炎克雷伯菌在已鉴别的4种强毒性 血清型中K1血清型菌株所占比例高，较为流行。与已鉴定的以上7种血清型相比，其他血清型所占比例较大，如需进一步了解其他未鉴定的血清型菌株在国内的分布，则需对临床分离株进行其他血清型分型，以期明确是其他血清型的肺炎克雷伯菌在我国的分布和流行趋势。310株肺炎克雷伯菌中11种毒力基因都出现不同程度的缺失现象，推测其毒力因子的分布可能与血清型有一定的关系。本研究揭示了我国重庆、北京、深圳三地肺炎克雷伯菌株的血清型分布及流行趋势，毒力基因的分布特点和缺失情况，从而为其分型、溯源、合理治疗奠定理论基础，，为该菌的感染防治开创新的前景。
[Abstract]:Klebsiella pneumoniae is Gram - negative bacilli and is widely distributed in the respiratory tract and intestinal tract of healthy people and animals . The infection type mainly includes pneumonia , meningitis , liver abscess , endophthalmitis , urinary system inflammation , wound infection and septicemia .

K54 and K57 strains are associated with severe infectious diseases of human and animal bodies .

In this paper , we study the isolation and identification of Klebsiella pneumoniae , the drug - resistant condition , the condition of producing extended - spectrum and the related risk factors , the epidemiological studies have reported relatively many , and lack of capsular serotype and virulence genes . Therefore , we can predict the distribution and deletion of the virulent genes in Chongqing , Beijing and Shenzhen , and to estimate the possible diseases caused by the virulence genes that the isolates may carry , thus laying the theoretical foundation for the classification , tracing and rational treatment of Klebsiella pneumoniae strains in China .

In this study , we isolated 310 strains of Klebsiella pneumoniae strains from Chongqing , Beijing and Shenzhen from China . By using polymerase chain reaction ( PCR ) , the target gene of PCR was selected to include khe and its virulence genes . The reaction system was 30 渭L . The reaction conditions were as follows : pre - denaturation at 95 鈩

本文编号：1965252