TC-1-HPV16L1细胞模型与动物模型的建立与评价
本文选题:细胞模型 + 动物模型 ; 参考:《北京工业大学学报》2016年10期
【摘要】:为了解决人乳头瘤病毒16型L1蛋白(HPV16L1)为主要靶点的疫苗缺乏肿瘤模型细胞来验证疫苗的免疫效果的问题,构建了一个细胞模型并可以利用此细胞在实验动物体内形成肿瘤,用于以HPV16L1为主要靶点疫苗的验证实验.利用这个模型细胞或肿瘤模型可以在体内外检测疫苗的免疫学性质和保护功效.首先,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的方法获得目标基因HPV16L1的基因序列并连接到载体质粒中,将质粒转染到细胞TC-1后在杀稻瘟菌素抗性压力筛选下获得稳定表达HPV16L1的细胞株.对TC-1和TC-1-HPV16L1两种细胞的生长增殖和成瘤特性进行比较发现,外源基因的加入对细胞特性没有影响.通过体外杀伤实验证实细胞TC-1-HPV16L1能够被HPV16L1靶点疫苗免疫过的小鼠脾淋巴细胞杀伤.实验动物被疫苗免疫后,进行攻瘤实验发现疫苗只对TC-1-HPV16L1组具有保护作用.综上,在本研究中成功地构建了可以检测HPV16L1疫苗的抑瘤效果的模型细胞TC-1-HPV16L1,为HPV疫苗的研究提供了一个模型细胞.
[Abstract]:In order to solve the problem that human papillomavirus type 16 L1 protein (HPV16L1) vaccine lacks tumor model cells to verify the immune effect of the vaccine, a cell model was constructed and used to form tumors in experimental animals. It was used in the validation of HPV16 L1 vaccine. This model cell or tumor model can be used to detect the immunological properties and protective effects of the vaccine in vitro and in vivo. Firstly, the gene sequence of target gene HPV16L1 was obtained by polymerase chain reaction (PCR) and ligated into the vector plasmid. After transfection into TC-1 cell line, stable HPV16L1 cell line was obtained under the screening of rice blast resistance pressure. The growth, proliferation and tumorigenic characteristics of TC-1 and TC-1-HPV16L1 cells were compared. It was found that the addition of exogenous gene had no effect on the cell characteristics of TC-1 and TC-1-HPV16L1 cells. It was proved that TC-1-HPV16L1 cells could be killed by murine spleen lymphocytes immunized with HPV16L1 target vaccine in vitro. After immunized with the vaccine, the tumor attack test showed that the vaccine only had protective effect on TC-1-HPV16L1 group. In conclusion, the model cell TC-1-HPV16L1 was successfully constructed in this study, which can detect the inhibitory effect of HPV16L1 vaccine, which provides a model cell for the study of HPV vaccine.
【作者单位】: 北京工业大学生命科学与生物工程学院环境病毒学北京市重点实验室;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室;
【基金】:国家“863”计划资助项目(2012AA02A404)
【分类号】:R737.33;R-332
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,本文编号:2076123
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