Wnt通路调控记忆性T细胞的增殖活化
本文选题:树突状细胞 + 记忆性T细胞 ; 参考:《细胞与分子免疫学杂志》2016年12期
【摘要】:目的探讨Wnt通路在记忆性T细胞(TM)增殖活化中发挥的调控作用。方法建立同种异体(BALB/c-C57BL/6)小鼠皮肤移植模型,采用免疫磁珠方法分选培养C57BL/6小鼠未成熟树突状细胞(imDC)、成熟树突状细胞(mDC)和TM,流式细胞术鉴定。在96孔板或TranswellTM中用imDC和负载BALB/c小鼠抗原的mDC与TM进行混合淋巴细胞反应(MLR)。氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)检测TM的增殖情况。ELISA检测培养上清中白细胞介素2(IL-2)、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)的水平。实时定量PCR检测imDC和mDC中Wnt基因的表达情况。双荧光素酶报告基因检测MLR中TM的β联蛋白/T细胞因子(β-catenin/TCF)信号通路转录活性。结果与对照组相比,在96孔板中负载BALB/c小鼠抗原的mDC显著诱导TM的增殖,上调IL-2和IFN-γ,下调IL-10的表达。mDC中Wnt3a和Wnt5a的mRNA表达水平显著高于imDC。mDC与TM共培养可显著增强TM的β-catenin/TCF信号通路转录活性。而在TranswellTM中培养的细胞基本未见细胞增殖。结论负载供者抗原的受者小鼠mDC可通过直接接触的方式有效激活受者效应型TM的增殖,Wnt通路的β-catenin/TCF转录激活可能是介导TM活化增殖的重要信号通路。
[Abstract]:Objective to investigate the regulatory role of Wnt pathway in the proliferation and activation of memory T cells (TM). Methods the skin allograft model of allogenic (BALB/c-C57BL/6) mice was established, the immature dendritic cells (imDC), mature dendritic cells (mDC) and TM, flow cytometry (FCM) were identified by immunomagnetic beads, and 96 orifice plates or Trans were used. Mixed lymphocyte reaction (MLR) with mDC and TM with imDC and BALB/c mouse antigen in wellTM. Tritium labeled thymidine (3H-TdR) detection of the proliferation of TM,.ELISA detection of the level of interleukin 2 (IL-2), IL-10, interferon gamma (IFN- gamma) in the supernatant. The transcriptional activity of TM's beta couplet /T cytokine (beta -catenin/TCF) signaling pathway in MLR was detected by the luciferase reporter gene. Results compared with the control group, the mDC significantly induced the proliferation of TM in 96 Kong Banzhong loaded BALB/c mice antigen, up regulation of IL-2 and IFN- gamma, and the expression level of Wnt3a and purified IL-10 was significantly higher than that in the.MDC. Co culture with TM significantly enhanced the transcriptional activity of TM's beta -catenin/TCF signaling pathway. But the cells cultured in TranswellTM had no cell proliferation. Conclusion the mDC of the recipient mouse loaded with the donor antigen can effectively activate the proliferation of the receptor effector TM by direct contact, and the transcription activation of the beta -catenin/TCF in the Wnt pathway may be the mediating TM. An important signaling pathway to activate proliferation.
【作者单位】: 贵州省人民医院科教处循证医学科;
【基金】:国家自然科学基金(31360222) 贵州省科技联合基金(LH[2014]7034)
【分类号】:R392
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,本文编号:2109951
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