Anoxybacillus flavithermus subsp.yunnanensis的鉴定与有机溶剂耐受特性的研究

发布时间：2018-07-29 13:54

【摘要】：通过使用含有机溶剂的培养基对来自中国云南腾冲热泉的泥水混合样品进行筛选,分离获得了两株细菌,一株是具有具有乙醇耐受性的E13T,另一株是具有广谱有机溶剂耐受性的PGDY12。它们都是革兰氏阳性的严格嗜热细菌。这是第一次发现具有有机溶剂耐受性的严格嗜热细菌。 菌株E13T为兼性厌氧芽孢杆菌,能够在60℃下耐受浓度为13%(V/V)的乙醇。基于一系列生理生化指标、16S rRNA序列分析以及DNA-DNA杂交等数据,我们将E13 T菌株鉴定为Anoxybacillus flavithermus的一个新亚种。由于菌株PGDY12和E13 T菌株具有很高的相似性,我们把被PGDY12和E13 T菌株共同鉴定为一个新的亚种,并命名为：Anoxybacillus flavithermus subsp. yunnanensis subsp. nov.。这是第一个耐受有机溶剂的嗜热细菌新亚种。模式菌株E13T分别保藏在中国典型培养物保藏中心CCTCC AB2010187T和韩国典型菌种保藏中心KCTC 13759T。PGDY12已送至德国菌种保藏中心(DSMZ)保存,编号为DSM23293T。 菌株PGDY12也是一株兼性厌氧芽孢杆菌,能够移动。没有特殊的营养成分的需求,其生长温度的上限能够达到65℃(最适生长温度为55℃),并且能够在pH5.0-10.0范围内生长(最适pH为7.0)。相对对低毒性的乙醇,log Pow值在1.5-4.0的有机溶剂,比如,甲苯、苯、环己烷等,是极毒的。PGDY12能够在100%的这些极毒有机溶剂的浸泡下仍然能够幸存,并且也能够在含有高浓度极毒有机溶剂的液体培养基中生长。电镜图片显示当细胞受到外界有机溶剂的胁迫时,胞内物质会变得不再均一,而是呈一种扭曲的状态。 由于有机溶剂耐受菌在生物转化领域的作用越来越显著,人们已经把研究热点逐步转向寻找具有有机溶剂耐受性的菌株。但是目前研究的有机溶剂耐受菌集中于常温细菌。温度对细菌有机溶剂耐受的影响尚未见报道。我们通过测定PGDY12菌株在不同的温度下的有机溶剂耐受特性,以生化反应动力学理论为基础,应用Monod模型描述其生长过程中比生长速率(μ)与甲苯的添加浓度之间的关系。结果表明我们建立的温度与甲苯耐受性之间的数学模型可以定量表征PGDY12菌株的甲苯耐受性随温度的升高而急剧降低的特点。有机溶剂耐受性的这种强烈的温度依耐性,也从一个侧面解释了自然界中为何罕见具有有机溶剂耐受性的嗜热细菌。
[Abstract]:Two strains of bacteria, E13T with ethanol tolerance and PGDY12 with broad-spectrum organic solvent tolerance, were isolated from mixed samples of mud water from Tengchong hot spring in Yunnan Province by using organic solvent medium. They are all Gram-positive, strictly thermophilic bacteria. This is the first time a strictly thermophilic bacteria with organic solvent tolerance has been found. Strain E13T is a facultative anaerobic bacillus, which can tolerate ethanol with a concentration of 13% (V / V) at 60 鈩，

本文编号：2152889