骨髓间充质干细胞分泌因子对Ⅰ型变态反应的影响

发布时间：2018-10-24 22:25

【摘要】：目的：研究骨髓间充质干细胞分泌因子对实验性Ⅰ型变态反应的影响,并初步探讨其抗Ⅰ型变态反应的作用机制,为临床应用骨髓间充质干细胞治疗Ⅰ型变态反应提供理论依据。 方法：体内试验①采用全骨髓贴壁法分离和纯化大鼠BMSCs,传至第3代后收集细胞融合至80%-90%时上清液获取干细胞分泌因子。②以卵白蛋白为变应原致敏大鼠,制备大鼠含IgE的抗卵蛋白血清。③制备大鼠同种被动皮肤过敏(passive cutaneous anaphylaxls, PCA)动物模型,用分光光度比色法测量蓝斑的OD值,观察干细胞分泌因子对大鼠PCA的影响。④抗卵蛋白血清被动致敏大鼠肠系膜肥大细胞,观察干细胞分泌因子对亲同种细胞抗体介导的肥大细胞脱颗粒的影响。⑤利用组胺所致小鼠耳廓皮肤毛细血管通透性增高,采用分光光度比色法测定蓝斑OD值,观察干细胞分泌因子对组胺所致小鼠耳廓毛细血管通透性的作用。体外实验①采用全骨髓贴壁法分离和纯化大鼠BMSCs,收集第3-4代细胞达到80%-90%融合时的上清液获取干细胞分泌因子。离心去沉淀后-20℃冻存备用。②分离培养大鼠腹腔肥大细胞(Rat peritoneal mast cell, RPMC)。③分别以大鼠抗卵蛋白血清特异性被动致敏腹腔肥大细胞和用Compound48/80非特异性致敏肥大细胞。④添加干细胞分泌因子和酮替芬干预后,采用专性底物a-N-苯甲酰-DL-精氨酸-p-硝基苯胺(BAPNA),运用分光光度比色法测定大鼠腹腔肥大细胞释放类胰蛋白酶的影响；甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞脱颗粒的影响。 结果：整体条件下,①干细胞分泌因子和酮替芬对大鼠PCA均有明显抑制作用,与模型组相比有差异显著性(P0.01)；②干细胞分泌因子和酮替芬可抑制亲同种细胞抗体介导的肥大细胞脱颗粒,与模型组相比有差异显著性(P0.01)；③干细胞分泌因子和酮替芬可以抑制组胺所致小鼠耳廓毛细血管通透性增高的作用,与模型组比较均有显著性差异(P0.01)；但干细胞分泌因子的抑制作用均不如酮替芬组(P0.05)。体外实验可见：干细胞分泌因子、酮替芬对特异性和非特异性诱发肥大细胞脱颗粒和释放类胰蛋白酶均具有抑制作用,与模型对照组相比差异有显著性意义(P0.01)；但干细胞分泌因子抑制的效果均不如酮替芬组(P0.05)。 结论：干细胞分泌因子具有抗Ⅰ型变态反应的作用。其作用机制与稳定肥大细胞膜,抑制肥大细胞脱颗粒,减少颗粒体中的活性介质释放有关。
[Abstract]:Objective: to study the effect of bone marrow mesenchymal stem cell secretory factor on experimental type 鈪，

本文编号：2292743