β肾上腺素能受体在输尿管ICC细胞上的表达及其功能研究

发布时间：2018-11-06 19:09

【摘要】：背景及目的 Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)是首先在消化道中被发现,分布在自主神经末梢和平滑肌细胞之间一种特殊间质细胞。研究表明,ICC细胞可以起搏胃肠道基本电节律(basic electrical rhythm, BER),其突起形成的网络能够传播BER;ICC细胞还可作为壁内神经信息向平滑肌传送的中转站,并对有关信号起整合作用,尤其在调节NO依赖性的神经递质方面起重要作用。随着对ICC细胞研究的深入,Smet等在豚鼠和人的膀胱上发现了ICC细胞,接着又在人和动物的输尿管、肾盂等多个部位也发现了ICC细胞。同时,Ross等通过免疫组化发现泌尿系ICC细胞与神经联系紧密,并可能参与神经元对平滑肌的调控。自主神经系统在输尿管的收缩和舒张运动中起到了重要的作用,交感神经可以通过α受体和β受体来分别引起输尿管的收缩和舒张,胆碱能神经通过作用于毒蕈碱受体来调控输尿管的收缩。交感神经分泌的肾上腺素能神经递质能够作用于β肾上腺素能受体,从而引起输尿管的舒张。β受体可以分成β1、β2和β3三个亚型,在很多哺乳动物的输尿管上,存在β肾上腺素能受体亚型的分布,比如狗的输尿管表达β3、大鼠的输尿管表达β1、兔子的输尿管表达β2、豚鼠只表达β3,而人可以表达β1、β2和β3,肾上腺素能神经递质作用于相关β受体亚型后,可以降低输尿管的收缩力和改变输尿管的收缩形式,在输尿管的舒张运动中起到重要作用。在胃肠道中,ICC细胞可以表达多种神经受体,如嘌呤能受体、胆碱能、缓激肽受体和前列腺素受体。我们前期研究表明,输尿管ICC细胞膜上表达胆碱能受体并且参与了胆碱能神经对输尿管收缩的调控。那么,输尿管ICC细胞是否表达β肾上腺素能受体并参与肾上腺素能神经对输尿管运动的调控?目前国内外还未见相关报道。本研究通过免疫荧光染色的方法直接观察ICC细胞上β肾上腺素受体亚型的表达情况;以及通过测定豚鼠输尿管肌条兴奋性和收缩性的方法,观察Glivec特异性阻断ICC细胞后,对β肾上腺素能受体激动剂舒张输尿管肌条功能的影响,来研究输尿管ICC细胞在输尿管收缩和舒张功能调节中的作用。从而,初步探讨输尿管ICC细胞在肾上素能神经递质传递中的作用,结果有助于进一步阐明输尿管神经调控机制,为输尿管收缩和舒张功能异常的研究提供新的切入点。方法本课题以成年豚鼠为研究对象。(1)形态学观察:采用免疫荧光染色法,在激光共聚焦显微镜下观察输尿管ICC细胞上β肾上腺素受体亚型(β1、β2和β3)的表达;(2)功能学研究:在体外,运用肌条实验方法,对比实验组(阻断了ICC细胞的肌条)和对照组(正常豚鼠肌条)在β受体激动剂作用下兴奋性及收缩性的变化,来研究ICC细胞上β肾上腺素受体的功能以及ICC细胞对β肾上腺素受体的功能的影响。结果 1.激光共聚焦显微镜下观察显示,豚鼠输尿管内可见c-kit染色阳性的输尿管ICC细胞。 2.输尿管ICC细胞表达β3受体,未见β1、β2受体表达。 3.在一定前负荷下(2.0g),输尿管肌条出现自发性收缩,CGP12177(选择性β3受体激动剂)可引起自发性收缩振幅显著降低,自发性收缩频率减慢;表明β3受体激动剂能够对豚鼠输尿管产生舒张效应。 4. Glivec阻断输尿管ICC细胞后,CGP12177对输尿管肌条的自发性收缩的舒张效应减弱;表明ICC细胞能够影响输尿管β3受体的舒张功能。 5.异丙肾上腺素能够引起肌条的舒张;Glivec阻断输尿管ICC细胞后,异丙肾上腺素对输尿管肌条的自发性收缩的舒张效应亦减弱。可见,ICC细胞参与了异丙肾上腺素对输尿管的舒张作用,即表明ICC细胞可能参与肾上腺素能神经递质对输尿管的舒张作用,并可能介导肾上腺素能神经递质的传递。结论 1.豚鼠输尿管ICC细胞上表达肾上腺素能β3受体。 2.激动ICC细胞上β3受体能够引起输尿管舒张。 3.ICC细胞可能介导肾上腺素能神经递质的传递。 4.肾上腺素能神经可能通过激活ICC细胞上的肾上腺素β3受体来调节输尿管舒张。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R329

【参考文献】